EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0926图片
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2017-01-05 10:26:13
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产品简介

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0926图片售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

详细介绍

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0926图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0926图片
形态特性  淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性  该细胞系来源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
传代方法  1:2传代;5-6天一次
传代情况 P2
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR  -
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

小鼠肠动脉内细胞*培养基100mL
Ampicillin(100mg/ml,1000X)规格:5*1ml
人视网膜微血管内细胞*培养基100mL
M-FC琼脂/滤膜粪大肠菌琼脂/M-FC Agar大肠杆菌群的滤膜法检测250克国产/进口
人淋巴血管内细胞*培养基100mL
大肠菌群显色培养基/Coliform Chromogenic Medium快速准确检测大肠菌群,大肠菌群培养24小时,显兰色1升国产/进口
猫肾上细胞英文名称:CRFK
酪蛋白琼脂/水解酪蛋白琼脂/Casein Agar Medium用于鉴别蜡样芽孢杆菌分解酪蛋白试验250克国产/进口
大鼠肾管状上细胞*培养基100mL
糖蛋白胨培养液/糖蛋白胨肉汤/Lactose Peptone Broth饮用水中总大肠菌群多管发酵法检验250克国产/进口
UMR-106(大鼠骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2
乙基紫叠氮钠肉汤/EVA肉汤/EVA Broth用于链球菌的增菌培养250克国产/进口
RN-c, 大鼠质神经元
HPAC(人胰腺腺泡上)5×106cells/瓶×2
NCI-H23(人非小细胞肺细胞)5×106cells/瓶×2gersion
人直肠平滑肌细胞*培养基100mL抑肽素 APepstatin A
AP106AP106
DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 25 kDaDiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 25 kDa
15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin J2 Lipid Maps MS Standard (5 mg)15-deoxy-Δ12,14-PGJ2, 15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin J2 Lipid Maps MS Standard, 11-oxo-prosta-5Z,9,12E,14Z-tetraen-1-oic acid
8-iso-15-keto Prostaglandin F2β (5 mg)8-iso-15-keto Prostaglandin F2β, 9.beta.,11.alpha.-dihydroxy-15-oxo-(8.beta.)-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid
15-S)-HETE Ethanolamide (500 ug)15(S)-HAEA, 15-S)-HETE Ethanolamide, 15(S)-hydroxy-N-(2-hydroxyethyl)-5Z,8Z,11Z,13E-eicosatetraenamide
MAM2201 N--4-hydroxypentyl) metabolite (5 mg)MAM2201 N--4-hydroxypentyl) metabolite, (1-(5-fluoro-4-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl)(4-methylnaphthalen-1-yl)methanone
15-keto Latanoprost (100 mg)15-keto Latanoprost, 9.alpha.,11.alpha.-dihydroxy-15-oxo-17-phenyl-18,19,2-trinor-prost-5Z-en-1-oic acid, isopropyl ester
D-myo-Inositol-1,3,4-triphosphate (sodium salt) (5 mg)Ins(1,3,4)-P3 (sodium salt)|1,3,4-IP3 (sodium salt), D-myo-Inositol-1,3,4-triphosphate, D-myo-inositol-1,3,4-tris(dihydrogen phosphate), trisodium salt
25I-NBOMe (hydrochloride) (5 mg)25I-NBOMe, 4-iodo-2,5-dimethoxy-N-[(2-methoxyphenyl)methyl]-benzeneethanamine, monohydrochloride
L-色氨酸(25GM)L-Tryptophan, CAS# 73-22-3; MW 204.23; USP
中国蓝蔷薇酸琼脂250克国产/进口
Ca Ski(人宫颈上细胞)5×106cells/瓶×2
G1(发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞)5×106cells/瓶×2
MuM-2B(人眼脉络黑色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2gersion

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