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人慢性髓系白血病细胞;K562图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人慢性髓系白血病细胞;K562图片
形态特性 淋巴母细胞样;圆形
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞系由Lozzio and Lozzio 于1975年从一名53岁慢性髓系白血病女性患者的胸水中分离建立。此细胞株被广泛用于自然杀伤方面的研究。K-562母细胞是一种具多能性的造血系统的恶性肿瘤细胞,能自发分化成可识别的红系、粒系和单核系的祖细胞;表达CD7。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:3传代;3-5天一次
传代情况 PN12
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR Amelogenin:X;D8S1179:12;D21S11:29, 31;D7S820:9,11;CSF1PO:9,10;D3S1358:16;TH01:9.3;D13S317:8;D16S539:11,12;D2S1338:17;D19S433:14,14.2;vWA:16;THOX:8, 9;D18S51:15,16;D5S818:11,12;FGA:21, 24。
同工酶
染色体 59-68
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
杂交袋20 个
链霉亲和素,AP 标记0.5mL
1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 盒装 )100 支
5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )1mL
UTP 溶液,100mM0.25mL
18-0690-100脂质氧化 (MDA) 检测试剂盒100 次
130905-10超杂交液 ( 芯片 )10mL
TE 缓冲液,PH8.010mL
非冻型血液 DNA 保存液100mL
多聚 -L- 赖氨酸 (15-30 万 )25mg
鱼类种属鉴定 PCR Mix100 次
CAS25988-63-0多聚 -L- 赖氨酸 (7-15 万 )25mg
130528-1植物蛋白酶抑制剂1mL
柱式动物线粒体 DNAout,测序15 次
冷冻型血液 RNA 保存液100mL
聚乙烯醇100g
微量 RNA 定量试剂盒1mL
CAS77-86-1三 ( 羟甲基 ) 氨基甲烷100g兔抗脑组织抗体(ABAb)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人总胆固醇(TC)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人载脂蛋白A4(apo-A4)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人胰蛋白酶原Ⅱ(Try-Ⅱ)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人纤溶酶原(Plg)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人脱氢表雄酮(DHEA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人输血传播毒/辛型肝炎毒((TTV)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人乳腺易感蛋白1(BRCA-1)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人破伤风抗体(Tetanus Ab)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人免疫球蛋白轻链kappa抗体(κ-IgLC)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人链激酶(SK)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人抗类风湿关节炎核抗原抗体(RANA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人抗IVIgG抗体ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人甲种胎儿球蛋白/人甲胎蛋白(AFP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人肝细胞生长因子受体(HGFR/ c-MET)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人多巴色素异构酶(DT)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人大内皮素(Big ET)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人波形蛋白(VIM)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人白介素5(IL-5)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装