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人结直肠腺癌细胞;HT-29价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
人结直肠腺癌细胞;HT-29价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮样;多角
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是1964年由Fogh J用移植培养方法和含15%FBS的F12培养液从原发性肿瘤分离的。近来,已建株的培养细胞用含血清的McCoy's 5a培养基培养。 该细胞系在裸鼠中成瘤,也能在类固醇处理的地鼠中成瘤。该细胞可合成IgA、CEA、TGFβ结合蛋白和黏液素;表达尿激酶受体,但没有检测到血浆酶原活性;不表达CD4,但细胞表面表达半乳糖神经酰胺(HIV的可能替代受体)。该细胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos阳性;p53基因过表达,并且在273位密码子处发
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:3传代;3-4天一次
传代情况 不详
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR Amelogenin:X;D8S1179:10, 16;D21S11:29,30;D7S820:10;CSF1PO:11, 12;D3S1358:15, 17;TH01:6, 9;D13S317:11, 12;D16S539:11, 12;D2S1338:19, 23;D19S433:14;vWA:17, 19;THOX:8, 9;D18S51:13;D5S818:11, 12;FGA:20, 22。
同工酶
染色体 68-72
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
120905-200人淋巴细胞分离液 1.077(FICOLL 配置 ) 200mL
80101-50一管式病毒 DNA-RNAout50 次
热启动 Taq DNA 聚合酶100U
磁珠法 mRNA 提取试剂盒25 次
一管式 DNA 胶回收试剂盒100 次
小鼠瘤细胞分离液 1.070200mL
18-0370-50活性氧 ( 羟自由基 ) 测试盒 ( 比色法 )50 T
100816-250碱性胶电泳液 ,10×250mL
山羊抗兔 IgG(Fc),碱性磷酸酶标记100μL
DNA EDTA 溶液 ,0.5M,PH8.01 100mL
非冻型细菌 RNA 保存液100mL
BL21(DE3)plysS 菌种1mL
130614-200Therminator DNA 聚合酶200U
90308-25亲和硅烷 25mL
T4 DNA 连接酶1000U
蛋白磷酸酶抑制剂混合液 11mL
柱式昆虫 RNAout50 次
小鼠抗 V5 标签单抗100μL
120508-0.063肠激酶 ( 轻链 )0.063μg植物细胞分裂素(Cytokinin)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠鼠痘毒(MPV)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠皮质醇(Cortisol)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠高迁移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
兔子细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
兔子表皮生长因子(EGF)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
兔抗平滑肌抗体(ASMA) ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人载脂蛋白B1(apo-B1)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人纤溶酶原激活剂(PLGA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人乳腺易感蛋白2(BRCA-2)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装