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二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-*直销操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-*直销现货直销,免费快递送货上门。公司供应各种细胞株,细胞系,种类齐全,现货,质量保证,公司所有产品仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。
产品名称 | |
用途 | 仅用科研 |
保存条件 | 4℃保存一年;-20℃长期保存 |
细胞名称
形态特性 上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞为二氢叶酸还原酶缺陷细胞。 在没有HT(次黄嘌呤-胸腺嘧啶)时细胞会死亡。 细胞培液中加氨甲喋呤可以防止对药物低抗性的回变细胞的生长。
培养条件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 优质胎牛血清,10%;0.1mM次黄嘌呤,0.016mM胸腺嘧啶,100nM氨甲喋呤
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
运输保存:
采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
保存条件:4℃保存一年;-20℃长期保存
用途:只可用于科研。
储存:液氮。
运输:干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
注意:*次植入后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中,出现任何问题(人为或者非人为),导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性,支持客户检测对应的biomarker,(如证明细胞错误,全额退款。)公司针对每株细胞,鉴定gene background,鉴定完成的细胞可以提供数据,用于证明细胞的真实性,并且帮助客户更多的了解细胞特性。
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点击 人肠静脉内皮细胞培养试剂盒胞 人肠静脉内皮细胞培养试剂盒胞 试剂盒 试剂盒 元50 次 DNA 电泳分子量标准 (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ
100U DNA 促旋酶 (E.coli)
D- 甘露醇 CAS69-65-8 250g
十二烷基磺酸 131049-100 100g
50 次 柱式水样 DNAout
10mg 莽草酸
100g 矮壮素
100mL RNase-free CTAB 溶液 ,20%
1mL Y187 酵母种
ATP 依赖的 DNase 120510-200 200U
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒 100947-30 30 次
10mL 微量核酸沉淀剂
1g Hemoglobin(NO 清除剂 )
5g D(+) 木糖
250 mL Zamboni 固定液
维生素 B1 CAS59-43-8 10g
成骨细胞生长因子 21-0010-5 5mL
柱式冻存血液 DNAout 120720-50 50 次