ATCC 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4A价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4A价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 CHO-HCV-NS4A细胞整合有丙型肝炎病毒的NS4A基因,能稳定表达NS4A蛋白,是HCV基础研究的*摸型。它由武汉大学病毒学国家重点实验室郭佳博士于2008年构建并保存。
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C20
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
PHENYLTRIALLYLSILANE 分子式: 228.4 分子量: C15H20Si 英文名称: PHENYLTRIALLYLSILANE CAS号: 2633-57-0
泛昔洛韦 分子式: 321.33 分子量: C14H19N5O4 英文名称: Famciclovir CAS号: 104227-87-4
苄基三苯基氯化膦 分子式: 388.87 分子量: C25H22ClP 英文名称: Benzyl three phenyl chloride CAS号: 1100-88-5
裨士麦棕Y 分子式: 分子量: 英文名称: New Smyrna brown Y CAS号:
铬蓝黑R 分子式: 416.39 分子量: C20H13N2NaO5S 英文名称: Chrome blue black R CAS号: 2538-85-4
细胞染色剂黄绿素-AM 分子式: 994.857 分子量: C46H46N2O23 英文名称: Cell stain calcein -AM CAS号: 148504-34-1
醌茜隐色体 分子式: 242.23 分子量: C14H10O4 英文名称: The color of the body CAS号: 476-60-8
马尿酸 分子式: 179.17 分子量: C9H9NO3 英文名称: Iodohippurate CAS号: 495-69-2
1-辛烯 分子式: 112.21 分子量: C8H16 英文名称: 1- Sim CAS号: 111-66-0
妥曲珠利砜 分子式: 457.38 分子量: C18H14F3N3O6S 英文名称: Toltrazuril sulfone CAS号: 69004-04-2
毛蕊异黄酮苷 分子式: 446.4 分子量: C22H22O10 英文名称: The isoflavone glycosides CAS号: 20633-67-4
诺孕美特 分子式: 372.55 分子量: C23H32O4 英文名称: Norgestomet CAS号: 25092-41-5 芥子酸 CAS530-59-6 1g
长效期 SDS-PAGE 上样液 100911-1 1mL
50 只 离心管 ( 配研磨杵用 )
1g 卵白蛋白
3000U 谷氨酸脱氢酶
100 T ROS 活性氧检测试剂盒
胶原酶Ⅲ型 CAS9001-12-1 100mg
山羊抗人 IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记 131151-300 300μL
软骨 RNAout 70401-50 50 次
1g n- 十二烷基 -β-D- 麦芽糖苷
1个 4mL DNA 离心超滤管 (30-50 KD)
5mL 上皮细胞生长因子
100g 电泳尿素
少突胶质前体细胞生长因子 21-0330-5 5mL
RNA EDTA·2Na ( 乙二胺四二 ) 101223-100 100g
250 mL PLPD 固定液
500U BglII
200mg L-NAME(eNOS 抑制剂 )
50 次 端粒酶重复片段扩增试剂盒 (TRAP)
LPS(TLR4 激活剂 ) 23-0450-0.5 0.5mg
一管式植物 DNAout 60705-50 50 次
25mg RNA Oligo(dT) 纤维素
25μL Cy5-dCTP 溶液,10mM