AGL1 农杆菌感受态细胞10×100μL供应
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2017-02-12 08:45:11
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产品简介

AGL1 农杆菌感受态细胞10×100μL供应运输及保存 干冰运输、-80℃保存,避免反复冻融,有效期半年。

详细介绍

AGL1 农杆菌感受态细胞10×100μL供应产品及特点:

本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞,适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株,用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测,本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域,该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂,Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后,发生重组后就可产生重组 Bacmid,提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外,DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象,用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为:F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
AGL1 农杆菌感受态细胞10×100μL供应规格及成分:

AGL1 农杆菌感受态细胞10×100μL供应使用方法:
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL,可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒,用移液器轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC(不含抗生素),混匀后置于 37℃ 摇床, 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释,如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体*吸收后,倒置平板, 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,视平板上菌落生长情况决定去留。

小肠结肠炎耶尔森氏菌 Yersinia enterocolitica
串珠镰孢 Fusarium moniliforme
卵巢英文名称:CoC2(悬浮)
mEPC, 小鼠内皮祖细胞-骨髓 Mouse
异常汉逊酵母 Hansenula anomala
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
LLC-WRC 256(大鼠腹水细胞)5×106cells/瓶×2
瑞士杆菌 Lactobacillus helveticus
柄链格孢=柄格孢菌 Alternaria longipes
大鼠小肠血管内皮细胞*培养基100mL猪白介素10(IL-10)ELISA Kit
猪热休克蛋白20(HSP-20)ELISA Kit
3,3’,5,5’-Tetramethyl Benzidine Dihydrochloride(3,3',5,5'-四甲基联苯胺二盐酸)
DNASarkosyl
RNA2-Mercaptoethanol
胆固醇
环孢霉素A
磷酸二氢钾
硼氢化氰钠
台盼蓝
胰蛋白胨(Tryptone)
制霉菌素溶液
3 透明剂
碱性乙醇,1.6%NaCl in 80%乙醇
Russel改良Zenker固定液
Kinyoun石碳酸复红(Kinyoun's Solution)
Hamason and lushbangh 法网状纤维染色试剂盒
Luxol 坚牢蓝PAS染色法神经组织染色试剂盒
AGL1 农杆菌感受态细胞10×100μL供应酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
EJ(人膀胱细胞)5×106cells/瓶×2
植物杆菌 Lactobacillus plantarum
根瘤菌 Rhizobium sp.
大鼠肺大静脉内皮细胞*培养基100mL

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