GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL现货
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2017-02-12 08:46:48
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产品简介

GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL现货运输及保存 干冰运输、-80℃保存,避免反复冻融,有效期半年。

详细介绍

GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL现货产品及特点:


本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞,适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株,用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测,本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域,该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂,Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后,发生重组后就可产生重组 Bacmid,提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外,DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象,用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为:F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL现货规格及成分:

GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL现货使用方法:
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL,可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒,用移液器轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC(不含抗生素),混匀后置于 37℃ 摇床, 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释,如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体*吸收后,倒置平板, 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,视平板上菌落生长情况决定去留。

石刁柏(芦笋)拟茎点霉 Phomopsis asparagi
人成巨核细胞白血病细胞英文名称:Daudi
普雷恩毛霉 Mucor prainii
胶韧革菌 Gloeostereum incarnatum
Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)规格:10000次
大鼠食管平滑肌细胞*培养基100mL
树状黄杆菌 Flavobacterium arborescens
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
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杆菌属 Lactobacillus sp.
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
NCI-H524(人非小细胞肺细胞)5×106cells/瓶×2gersionmUkG1
pACEBac2
pAG415GAL-ccdB-EYFP(pAG415GALccdBEYFP)
pAmCyan1-N1(pAmCyan1N1)
pBact-myc(pBactmyc)
pBI Tet(pBITet)(60908-762)
pBMTBX-3(pBMTBX3)
pCAB42
pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro(pCDHCMVMCSEF1Puro)(60908-1363)
pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative(pcDNA6.2GWEmGFPmiRnegative)
pCMV-3Tag-1C(pCMV3Tag1C)
pCMV6-A-Hygro(pCMV6AHygro)
pCoBlast
pCYM1
pDO17
pEarleyGate 204(pEarleyGate204)
pEMBLYe24
GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL现货pET-32a(+)(pET32a)(60908- 2801)y
pET-HisK(pETHisK)
苏云金芽孢杆菌肯尼亚亚种 Bacillus thuringiensis subsp. Kenyae
金色横裂链霉菌 Streptomyces aureosegmentosus
异常汉逊酵母 Hansenula anomala
真姬菇 Hypsizigus marmoreus
B16-F10(小鼠皮肤黑色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2

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