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商品介绍:
GCS(EC 2.4.1.11)催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UTP,以α-1,4-糖苷键相连延长糖链,是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶,是胰岛素作用的主要靶酶,对糖代谢的调节和血糖稳态的维持具有重要作用。
测定原理:
GCS催化UDPG和葡萄糖残基生成糖原和UTP,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映GCS活性。
需自备的仪器和用品:
分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
糖原合成酶(GCS)紫外分光光度法测试盒 | 50管/48样 | 紫外分光光度法 | GOY-01S6974 |
剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
测定操作表:
酶活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)÷T= 18×A460÷细胞数量
(4) 按液体体积计算
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反总÷V样÷T= 18×A460
ε:氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数:7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中样本体积,0.05mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,30min
b. 用96孔板测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
凝胶法 miRNA 分离试剂盒 50 次 柱式腐殖酸清除剂30 次
一站式大提柱式 miRNAout5次 柱式腐殖酸清除剂100 次
一站式动物 mRNAout25 次 柱式粪便 RNAout50 次
一站式全血 mRNAout25 次 柱式粪便 DNAout50 次
一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒50 次 柱式分枝杆菌 RNAout50 次
柱式尿液 DNAout50 次 一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒30 次
柱式鼠尾 DNAout50 次 一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒100 次
柱式海洋动物 DNAout50 次 一步式 RT-PCR Mix 1mL
植物 DNAout50 次 一步式 PAGE 染液10 次
柱式植物 DNAout50 次 一步离心式石蜡清除剂100 次
Bradford 蛋白定量试剂盒1000T
Bradford 蛋白定量试剂盒250T
Bradford法蛋白检测试剂盒 100T/96样
BSA标准1ml
BSA标准5ml
糖原合成酶(GCS)紫外分光光度法测试盒AP 标记的抗抗体10μL 环氧基磁珠2mL
HRP 标记的抗抗体10μL A 溶液 ,10mg/mL1mL
显影定影套装1套 滑膜细胞生长因子5mL
显影粉1袋 红细胞裂解液 B 型 ( 流式细胞分析用 ) 100mL
定影粉1袋 红细胞裂解液 A 型 ( 核酸纯化 ) 100mL
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