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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:土壤过氧化氢酶(SCAT)紫外分光光度法测试盒
规格 : 50管/24样
测试方法: 紫外分光光度法
货号:GOY-01S6824
分类:土壤系列
商品介绍:
S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类,在H2O2清除系统中具有重要作用。
测定原理:
H2O2在240nm下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应S-CAT活性的高低。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
DNA 电泳分子量标准 (100-1500 bp)50 次 G 钾盐溶液 ,200mg/mL1 Mu
DNA 电泳分子量标准 (100-5000 bp)50 次 亲和硅烷 25mL
DNA 电泳分子量标准 (300-10000 bp)50 次 亲和层析柱6 mL
DNA 电泳分子量标准 (2)(50-400 bp)50 次 亲和层析柱50 mL
DNA 电泳分子量标准 (2)(300-5000 bp)50 次 亲和层析柱30 mL
人白细胞分离液 1.078200mL 0.5mL DNA 离心超滤管 (90-150 KD)1个
人中性粒细胞分离液 1.085200mL 0.5mL DNA 离心超滤管 (30-50 KD)1个
人粒细胞分离液 1.113200mL 0.5mL DNA 离心超滤管 (150-250 KD)1个
小鼠肿瘤细胞分离液 1.070200mL
小鼠内皮细胞分离液 1.071200mL
仓鼠白介素1β(IL-1β)elisa检测试剂盒
仓鼠白介素2(IL-2)elisa分析检测试剂盒
仓鼠白介素2(IL-2)elisa检测试剂盒
仓鼠白介素3(IL-3)elisa分析检测试剂盒
仓鼠白介素3(IL-3)elisa检测试剂盒
土壤过氧化氢酶(SCAT)紫外分光光度法测试盒RNase 抑制剂 ( 人源 )400U 柱式 miRNA PAGE 胶回收试剂盒50 次
RNase 抑制剂 ( 人源 )2500U 柱式 G+细菌 RNAout50 次
RNase 抑制剂 ( 小鼠源 )3000U 柱式 DNA 清除剂50 次
RNase 抑制剂 ( 猪源 )500U 柱式 DNA 胶回收试剂盒50 次
非酶 DNA 清除剂1.5mL 柱式 DNA 胶回收试剂盒100 次
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。