其他品牌 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:氨基比林N去甲基化酶(AND)可见分光光度法测试盒
规格 : 50管/24样
测试方法: 可见分光光度法
货号:GOY-01S6779
分类:P454系列
商品介绍:
细胞色素P450酶是一组在外源物质代谢中,尤其是药物和毒物,具有重要作用的酶系。AND作为P450酶系的重要一员,相当于CYP3A4亚型,与药物的去甲基化反应密切相关。
测定原理:
AND催化氨基比林释放甲醛,通过Nash比色法测定甲醛含量,即可计算出AND活性。
自备仪器和用品:
普通离心机,超速离心机、水浴锅、可调式移液枪、紫外分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水、无水乙醇和冰。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
Fluorescein-12-dUTP 溶液,1mM25μL 酵母化学感受态细胞制备试剂盒20 次
Cy3-dCTP 溶液,10mM25μL 酵母化学感受态细胞制备试剂盒 ( 含转化液 )20 次
Cy5-dCTP 溶液,10mM25μL 酵母电转感受态细胞制备试剂盒20 次
柱式探针纯化试剂盒10 次 酵母蛋白酶抑制剂1mL
Sephadex G50 介质10mL 酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL
间充质干细胞软骨细胞分化生长因子5mL EGY48 酵母感受态细胞10×100μL
间充质干细胞生长因子5mL EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白级10mL
间充质干细胞生长因子 - 无血淸5mL EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白级10mL
间充质干细胞脂防细胞分化生长因子5mL EcoR I-Not I-BamH I 接头1nmol
角膜上皮细胞生长因子5mL ECL 法杂交检测试剂盒5次
大鼠1,25二羟基D3(1,25 DHVD3)elisa分析检测试剂盒
大鼠1,25二羟基D3(1,25 DHVD3)elisa检测试剂盒
大鼠1,25二羟基D3(1,25(OH)2D3/DVD/DHVD3)elisa检测试剂盒
大鼠1,25-二羟基D3(DHVD3)elisa检测试剂盒
大鼠1,25-二羟D(3)24-羟化酶,线粒体(CYP24A1)elisa分析检测试剂盒
氨基比林N去甲基化酶(AND)可见分光光度法测试盒暗盒 (5×7 英寸 )1个 素溶液 ,100mg/mL10mL
暗盒 (8×10 英寸 )1个 黑色素细胞生长因子5mL
DNA 包被溶液100mL 黑色素细胞生长因子 - 不含 TPA5mL
X 光片 (5×7 英寸 )1盒 核酸印迹膜染液100mL
X 光片 (8×10 英寸 )1盒 核酸稀释液,测 OD 专用100mL
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。