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产品名称:α葡萄糖苷酶(α GC)微量法测试盒
规格 : 100管/48样
测试方法: 微量法
货号:GOY-01S6736
分类:糖代谢系列
商品介绍:
α-GC(EC 3.2.1.20)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化水解芳基或烃基与糖基之间的α-糖苷键生成葡萄糖,不仅与细胞壁的松弛或加固有关,而且与细胞识别和一些信号分子产生密切相关。
测定原理:
α-GC分解对-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算α-GC活性。
自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
信号淋巴细胞活化分子CD150抗体 上皮细胞有丝分裂蛋白抗体
巨噬细胞炎性蛋白16抗体 上皮细胞微管相关蛋白7抗体
果蝇CG6856-PA抗体 上皮细胞特异性转录因子1抗体
氧化酶COX7A2抗体 上皮细胞特异性蛋白1抗体
剪切和多聚腺苷酸化特异性因子4抗体 上皮细胞膜蛋白3抗体
大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa检测试剂盒
大鼠肿瘤坏死因子β(TNFβ)elisa检测试剂盒
大鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)elisa检测试剂盒
大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)elisa检测试剂盒
大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa检测试剂盒
α葡萄糖苷酶(α GC)微量法测试盒鲍氏志贺菌冻干粉 化脓性链球菌 质控菌株。
乙酸钙不动杆菌 产碱假单胞菌
地衣芽孢杆菌 绳状青霉
拟囊体侧耳、(鲍鱼菇) 葡酒色被孢霉
塔宾曲霉 洋葱曲霉
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