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产品名称:果糖1,6二磷酸(FDP)可见分光光度法测试盒
规格 : 50管/48样
测试方法: 可见分光光度法
货号:GOY-01S6609
分类:糖酵解系列
商品介绍:
果糖1,6-二磷酸是机体内的高能代谢物和代谢调控剂,是糖酵解途径的重要中间体,广泛存在于动植物和微生物体内,能影响细胞内钾离子的浓度,改善葡萄糖和其他能量底物的代谢,促进组织氧的释放,广泛应用于临床医药制剂。
测定原理
醛缩酶催化果糖1,6-二磷酸降解,产物与DNPH缩合成紫红色物质,在540nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
cDNA 第二链合成试剂盒30 次 动物种属鉴定 PCR Mix 6100 次
一管式双链 cDNA 合成试剂盒10 次 动物种属鉴定 PCR Mix 5100 次
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg 动物种属鉴定 PCR Mix 4100 次
6nt 随机引物,0.5μg/μL5μg 动物种属鉴定 PCR Mix 3100 次
10nt 随机引物,0.5μg/μL5μg 动物种属鉴定 PCR Mix 2100 次
动物 DNAout100mL 一站式柱式 miRNAout50 次
动物 DNAout250mL 一站式植物 mRNAout25 次
柱式动物 DNAout50 次 一站式真菌 mRNAout25 次
磁珠动物 DNAout50 次 一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (2-30KD)30 次
Southern 级动物 DNAout5次 一站式长效期 SDS-PAGE 电泳套装 (>30KD)30 次
大鼠Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)elisa检测试剂盒
大鼠Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PⅠNP)elisa检测试剂盒
大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)elisa分析检测试剂盒
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果糖1,6二磷酸(FDP)可见分光光度法测试盒电泳级酚蓝溶液10mL 克必隆 B 载体2μg
电泳级橙黄 G 溶液10mL 可溶性两性霉素 B 溶液 ,20mg/mL1mL
PAGE 胶长加样枪头1盒 可逆性锌染试剂盒1套
水饱和10mL 可逆性铜染试剂盒1套
预混型丙 - 甲叉双丙烯干粉 (19:1)100g 可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制剂0.3mL
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