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商品介绍:
PK(EC 2.7.1.40)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化糖酵解过程中的最后一步反应,是糖酵解过程中的主要限速酶之一,也是产生ATP的关键酶之一,因此测定PK活性具有重要意义。
测定原理
PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸,乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映PK活性。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水
产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
丙酮酸激酶(PK)紫外分光光度法测试盒 | 50管/48样 | 紫外分光光度法 | GOY-01S6599 |
剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
测定操作表:
酶活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)÷T= 18×A460÷细胞数量
(4) 按液体体积计算
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反总÷V样÷T= 18×A460
ε:氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数:7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中样本体积,0.05mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,30min
b. 用96孔板测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
一步式 RT-PCR Mix 1mL 动物细胞核蛋白微量制备试剂盒100 次
免 RNA 提取 RT-PCR 试剂盒 100 次 动物上皮细胞生长因子5mL
即用型荧光定量 RT-PCR 试剂盒50 次 动物 RNAout(TRIzol) 250mL
即用型荧光定量 RT-PCR 试剂盒300 次 动物 RNAout(TRIzol) 100mL
通用型全基因组扩增试剂盒30 次 动物 DNAout250mL
电泳级丙溶液 ( 干粉型 )200mL 冷冻型血液 RNA 保存液100mL
电泳级甲叉双丙 25g 酪蛋白50g
电泳级 TEMED1.5mL 昆虫种属鉴定 PCR Mix100 次
电泳级过0.1gx10 昆虫细胞裂解液50mL
电泳级尿素100g 口腔角质细胞生长因子5mL
大鼠Ⅱ型胶原(COL2)elisa检测试剂盒
大鼠Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)elisa分析检测试剂盒
大鼠Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)elisa检测试剂盒
大鼠Ⅱ型胶原α1(COL2α1)elisa检测试剂盒
大鼠Ⅱ型胶原交联羧基端肽(CTXⅡ)elisa检测试剂盒
丙酮酸激酶(PK)紫外分光光度法测试盒动物 RNAout(TRIzol) 250mL 柱式质粒 DNAout50 次
柱式动物 RNAout50 次 柱式质粒 DNAout100 次
大提柱式动物 RNAout5次 柱式植物油 DNAout50 次
柱式动物 RNA-DNA 双提试剂盒50 次 柱式植物叶绿体 DNAout15 次
血液 RNAout 50 次 柱式植物 RNAout50 次
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