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产品名称:L半乳糖酸1,4内酯脱氢酶(Gal LDH)微量法测试盒
规格 : 100管/96样
测试方法: 微量法
货号:GOY-01S6392
分类:维生素代谢系列
商品介绍:
L-半乳糖途径是合成AsA的主要途径。Gal LDH位于线粒体内膜,负责催化植物体内AsA生物合成的最后一步,也是该途径的关键酶之一,对植物体内AsA含量的积累起着至关重要的作用。
测定原理:
Gal LDH催化L-半乳糖内酯还原(Cyt c),还原型Cyt c在550nm有吸收峰;测定还原型Cyt c增加速率,来计算Gal LDH活性。
自备仪器和用品:
台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
BEN结构域蛋白5抗体 胰岛素样生长因子结合蛋白7抗体
半乳糖转移酶7亚基β1,4抗体 胰岛素样生长因子结合蛋白6抗体
Bcl2相关抗凋亡基因6抗体 胰岛素样生长因子结合蛋白5抗体
组蛋白相关Bmi1抗体 胰岛素样生长因子结合蛋白4抗体
溴脱氧尿苷单克隆抗体(增殖标志物) 胰岛素样生长因子结合蛋白3抗体
大鼠红藻氨酸离子能受体2(GRIK2)elisa检测试剂盒
大鼠花生四烯酸(AA)elisa分析检测试剂盒
大鼠花生四烯酸(AA)elisa检测试剂盒
大鼠花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)elisa检测试剂盒
大鼠花生四烯酸12-脂氧合酶,白细胞型(Alox12l/Alox12/Alox15)elisa分析检测试剂盒
L半乳糖酸1,4内酯脱氢酶(Gal LDH)微量法测试盒一站式乙酸 - 尿素 PAGE 电泳套装30 次 lambda(λ)DNA5μg
Tricine-SDS-PAGE 配胶液250mL lambda(λ)DNA5μg
Tricine-SDS-PAGE 配胶液1000mL lambda(λ)DNA5μg
Tricine-SDS-PAGE 上样液1mL L- 甘肽 ( 还原型 )5g
Tricine-SDS-PAGE 上样液5mL KT5823(PKG 抑制剂 )50μg
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