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细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
产品名称:结肠癌细胞;HCT 116
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
货号:YS-02X9605
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻”,传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
OVA/HRP 辣根过氧化物酶标记兔抗鸡卵白蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
PACAP-38 腺苷酸环化酶激活肽-38(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
胸腺肽 α-1抗体 Thymosin α-1 0.1ml
S100 alpha 2 英文名称: S100A2抗体 0.2ml
EAAT3 英文名称: 胶质细胞谷酸运载蛋白3抗体(神经/上皮细胞谷酸运载蛋白) 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-KSR1 (Ser392) 磷酸化Ras信号转导KSR1蛋白抗体 规格 0.1ml
PACAP-38 腺苷酸环化酶激活肽-38(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
S100B(S100 calcium binding protein B)(human, mouse, rat, bovine, Rabbit, chicken) S100B蛋白多肽Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Bcl-xL Bcl-xL蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PHF8 组蛋白赖氨酸去甲基化酶PHF8抗体 规格 0.2ml
HSP70 热休克蛋白70 浓缩液 0.1ml 进口分装
UBXN2B 英文名称: UBXN2B蛋白抗体 0.1ml
CSFV 英文名称: 猪瘟病毒抗体 0.2ml
Bcl-xL Bcl-xL蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
SMC2 英文名称: 染色体结构维持蛋白2抗体 0.2ml
phospho-ERK1 (Thr202+Tyr204) + ERK2 (Thr185+Tyr187) 英文名称: 磷酸化原活化蛋白激酶ERK抗体 0.1ml
线粒体促凋亡蛋白抗体 Smac/DIABLO 0.1ml
Tetraspan5/FITC 荧光素标记四分子交联体5抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MAX protein(Tyr123) 磷酸化Myc基因相关X因子抗体 规格 0.1ml
MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又称:MYC 致癌基因(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
结肠癌细胞;HCT 116L-谷氨酸(sigma)苦菜子重组腺病PCR鉴定试剂盒
DL-谷氨酸桃金娘根腺病冻存培养基
肌氨酸珠子草腺病冻存培养基(动物实验)
甘氨酸-DL-亮氨酸乌贼墨Bosc23 包装克隆选择培养基
L-亮氨酰甘氨酸黄芫花PA317包装克隆选择培养基
蒜氨酸(标准品)荷叶重组逆转录病稳态表达克隆冻存试剂盒
L-脯氨酸蜂胶重组腺病构建试剂盒
DL-缬氨酸冬凌草重组腺病包装试剂盒