产品名称：小鼠皮下结缔组织细胞;L Wnt-3A

规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
货号：YS-02X9881

细胞生长实验 ：细胞生长良好，形态正常

储存条件：2℃-8℃，避光储存

运输条件：冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备RPMI-1640 培养基；优质胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

注意事项：

（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；

（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。

（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。

（5）关于“慢冻”，传统的方法，LLC细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步骤：

一）准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。

（二）校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。

（三）过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。

（四）分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。

（五）灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。

细胞特性：

1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。
VWCE/URG11/FITC 荧光素标记乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

CK8(Cytokeratin 8) 细胞角蛋白8(多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

5-羟色胺受体1B(5-HT/serotonin R1B)抗体  5-HTR1B 0.1ml

SEPT1 英文名称： 细胞分化蛋白SEP1抗体 0.2ml

Phospho-HER3 (Tyr1276) 英文名称： 磷酸化HER3受体抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-FSCN1(Ser39) 磷酸化纤维束蛋白同源物1抗体 规格 0.1ml

CK8(Cytokeratin 8) 细胞角蛋白8(多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

BNP(Human) 人脑钠素/脑钠尿肽Multi-class antibodies规格： 48T

 CK10 细胞角蛋白10抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NRAS 原癌基因N-Ras抗体 规格 0.1ml

Pre-stained Protein Marker 宽范围预染蛋白质分子量标准(20-120kDa)/6条带 100ul(20次)

TEF4 英文名称： 转录增强因子TEF4抗体 0.1ml

C8orf47 英文名称： 8号染色体开放阅读框47抗体 0.2ml

 CK10 细胞角蛋白10抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Goat  rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗兔IgG 0.1ml

FNBP3 英文名称： 甲精结合蛋白3抗体 0.1ml

FOSL1抗体  FOSL1 1ml

 phospho-PAK1/2/3(pThr423)/FITC 荧光素标记抗磷酸化p21激活激酶1/2/3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-STAT5a(Ser726) 磷酸化信号转导和转录激活因子5a抗体 规格 0.1ml

Avidin/Gold 金标记亲合素(10nm/15nm)Multi-class antibodies规格： 0.1ml
小鼠皮下结缔组织细胞;L Wnt-3A细胞内氧化应活性氧（ROS）高质绿色荧光测定试剂盒20次人腺苷酸环化酶1（AC-1）ELISA试剂盒,

细胞内氧化应活性氧（ROS）初级绿色荧光测定试剂盒100次人基质金属蛋白酶8/中性粒胶原酶（MMP-8）ELISA试剂盒,

活体组织氧化应活性氧（ROS）高质绿色荧光测定试剂盒8/20次人催产素（OT）ELISA试剂盒,

活体组织氧化应活性氧（ROS）初级绿色荧光测定试剂盒40/100次小鼠糖蛋白130（gp130）ELISA试剂盒,

冻切片氧化应活性氧（ROS）高质绿色荧光测定试剂盒50次人补体片断3b（C3b）ELISA试剂盒,

冻切片氧化应活性氧（ROS）初级绿色荧光测定试剂盒50次人纤溶抑制因子/凝血酶活的纤溶抑制物（TAFI）ELISA试剂盒,

/酵母细胞内氧化应活性氧（ROS）高质绿色荧光测定试剂盒20次人钙网蛋白（CRT）ELISA试剂盒,

/酵母细胞内氧化应活性氧（ROS）初级绿色荧光测定试剂盒50次人泛素蛋白（Ub）ELISA试剂盒,

植物细胞内氧化应活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒20次人弹性蛋白（ELN）ELISA试剂盒,

植物细胞内氧化应活性氧（ROS）初级荧光测定试剂盒50次小鼠苗条素受体（LR/Ob-R）ELISA试剂盒,

体液氧化应活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒50次小鼠结合珠蛋白/触珠蛋白（Hpt/HP）ELISA试剂盒,

体液氧化应活性氧（ROS）初级荧光测定试剂盒50次小鼠脱氢表雄酮硫酸酯（DHEA-S）ELISA试剂盒,

活体细胞氧化应活性氧（ROS）原位染色试剂盒（超氧阴离子）100次小鼠组（HIS）ELISA试剂盒,

冻切片氧化应活性氧（ROS）原位染色试剂盒（超氧阴离子）50次小鼠神经肽Y（NP-Y）ELISA试剂盒,

活体细胞氧化应活性氧（ROS）原位比色法定量检测试剂盒（超氧阴离子）100次小鼠6酮前列腺素（6-K-PG）ELISA试剂盒,