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细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
产品名称:输尿管上皮细胞*培养基
规格:100mL/125mL×4
货号:YS-02X10038
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻”,传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
RAP1A/FITC 荧光素标记抗Rap1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Beta-Amyloid (1-42) β淀粉样肽(1-42)(多肽蛋白)Multi-class antibodies规格: 0.1mg
瘦素抗体 Leptin 0.2ml
SV2A 英文名称: 突触泡蛋白2A抗体 0.2ml
FREAC3 英文名称: 叉头相关转录因子3抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759) 磷酸化磷酯酶Cγ2抗体 规格 0.1ml
Beta-Amyloid (1-42) β淀粉样肽(1-42)(多肽蛋白)Multi-class antibodies规格: 0.1mg
ILK-1(Rat) 大鼠整合素连接激酶1Multi-class antibodies规格: 48T
polyprotein (DHAV) 鸭甲型肝炎A病毒抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NDUFA10 NADH氧化还原酶10抗体 规格 0.2ml
Human plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit 人纤溶酶原激活物抑制因子 96T
SPR 英文名称: 墨蝶蛉还原酶抗体 0.2ml
CD158i 英文名称: NK细胞抑制性受体2DS4抗体 0.2ml
polyprotein (DHAV) 鸭甲型肝炎A病毒抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rabbit horse IgM/APC APC标记的兔抗马IgM 0.1ml
FAM135B 英文名称: FAM135B蛋白抗体 0.2ml
嗜铬粒素B抗体 CGB 0.2ml
OPN/FITC 荧光素标记骨桥蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PKC alpha 蛋白激酶C α抗体 规格 0.2ml
Rabbit rat IgM/HRP 辣根过氧化物酶标记兔抗大鼠IgMMulti-class antibodies规格: 0.1ml
输尿管上皮细胞*培养基品红亚硫酸盐(FUCHSIN SULFITE)染色试剂盒人单纯疱疹病抗原2(HSV-Ag2)ELISA试剂盒, HSV-Ag2 ELISA
动物组织冻切片糖蛋白高碘酸希尔(PAS)法50次人周期素依赖性酶2(CDK-2)ELISA试剂盒,CDK-2 ELISA
品红亚硫酸盐(FUCHSIN SULFITE)染色试剂盒人色氨酰tRNA合成酶(WARS)ELISA试剂盒,WARS ELISA
动物全组织糖蛋白高碘酸希尔(PAS)法10次人血小板型磷酸果糖酶(PFKP)ELISA试剂盒,PFKP ELISA
品红亚硫酸盐(FUCHSIN SULFITE)染色试剂盒人肽酰脯氨酰异构酶(亲环蛋白)样1(PPIL1)ELISA试剂盒,亲环蛋白样1
糖蛋白电泳高碘酸希尔(PAS)法5次人乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒,
品红亚硫酸盐(FUCHSIN SULFITE)染色试剂盒人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒,
聚糖对氨基(2-AA)荧光标记试剂盒20次人轴突生长诱向因子4(Ntn4)ELISA试剂盒,
聚糖对氨基甲酰胺(2-AB)荧光标记试剂盒20次人芳香烃受体(AhR)ELISA试剂盒,
聚糖邻氨基吡啶(2-AP)荧光标记试剂盒20次人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒,
聚糖二氨基亚甲基二氧基(DMB)荧光标记试剂盒20次人C多肽(CP) ELISA试剂盒,
氨基卞三磺酸(ANTS)荧光辅助糖蛋白电泳(FACE)5次人胰多肽(PP)ELISA试剂盒,
检测试剂盒人溶酶体相关膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA试剂盒,
邻氨基卞啶酮(AMAC)荧光辅助糖蛋白电泳(FACE)5次大鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒,
检测试剂盒萘啶酮酸每支添加于225ml HB4150、HB4192中(SN、GB标准)