产品名称：含10mL酶解缓冲液;III型胶原酶

规格：1mL
货号：YS-02X10339

细胞生长实验 ：细胞生长良好，形态正常

储存条件：2℃-8℃，避光储存

运输条件：冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备RPMI-1640 培养基；优质胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

注意事项：

（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；

（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。

（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于细胞而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。

（5）关于“慢冻”，传统的方法，细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步骤：

一）准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。

（二）校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。

（三）过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。

（四）分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。

（五）灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。

细胞特性：

1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。
HAS/FITC 荧光素标记兔抗人血清白蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

 TSLP/FITC 荧光素标记细胞生成素-1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh 5-HTT 5-羟色胺转运蛋白抗体 规格 0.1ml

Mouse  Bov IgG/Cy5 Cy5标记的小鼠抗IgG 0.1ml

GilZ 英文名称： 糖皮质诱导亮酸拉链蛋白抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh PTP1B 蛋白酪磷酸酶-1B 规格 0.1ml

 TSLP/FITC 荧光素标记细胞生成素-1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

CCSA-2(Human colon cancer-specific antigen-2) ELISA kit 人大肠癌专一抗原2Multi-class antibodies规格： 48T

 HCN4 环化核苷酸调控阳离子通道蛋白亚型4Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MIP-1 Alpha 巨噬细胞炎症因子1α抗体 MIP-1α 规格 0.1ml

NAP(Human neutrophilic alkaline phosphatase0 ELISA Kit 人中性粒细胞碱性磷酸酶 96T

RNF32 英文名称： 环指蛋白32抗体 0.2ml

CGNL1 英文名称： 结蛋白样蛋白CGNL1抗体 0.1ml

 HCN4 环化核苷酸调控阳离子通道蛋白亚型4Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rabbit  Biotin/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗生物素抗体IgG 0.1ml

GPR17 英文名称： G蛋白偶联受体17抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Acetyl-Histone H1b(K53) 乙酰化组蛋白H1b抗体 规格 0.2ml

 Phospho-Met (Tyr1349) /FITC 荧光素标记磷酸化肝细胞生长因子受体(原癌基因)抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Biotin whole serum 兔抗生物素抗血清 规格 1ml

 Tn-C/FITC 荧光素标记腱糖蛋白-C抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
含10mL酶解缓冲液;III型胶原酶油类E高效液相色谱法定量检测试剂盒20次幼禽螺杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒

铁成分比色法定量检测试剂盒20次禽腺病A型探针法荧光定量PCR试剂盒

碘成分比色法定量检测试剂盒20次嗜血杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒

细胞总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒20次副猪嗜血杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒

组织总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒20次串珠镰刀菌探针法荧光定量PCR试剂盒

血液总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒20次茄病镰刀菌探针法荧光定量PCR试剂盒

体液总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒20次副溶血嗜血杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒

植物总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒20次螺杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒

细胞总氨基酸含量荧光定量检测试剂盒20次乙型肝炎病G型探针法荧光定量PCR试剂盒

组织总氨基酸含量荧光定量检测试剂盒20次脑膜炎黄杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒

血液总氨基酸含量荧光定量检测试剂盒20次肠贾第虫探针法荧光定量PCR试剂盒

体液总氨基酸含量荧光定量检测试剂盒20次睡眠嗜组织菌探针法荧光定量PCR试剂盒

植物总氨基酸含量荧光定量检测试剂盒20次新凶手弗朗西斯菌探针法荧光定量PCR试剂盒

细胞游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒20次雪腐镰刀菌探针法荧光定量PCR试剂盒

组织游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒20次乙型肝炎病C型探针法荧光定量PCR试剂盒