产品名称：小鼠角膜上皮细胞*培养基

规格：100mL/125mL×4
货号：YS-02X10324

细胞生长实验 ：细胞生长良好，形态正常

储存条件：2℃-8℃，避光储存

运输条件：冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备RPMI-1640 培养基；优质胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

注意事项：

（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；

（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。

（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于细胞而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。

（5）关于“慢冻”，传统的方法，细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步骤：

一）准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。

（二）校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。

（三）过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。

（四）分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。

（五）灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。

细胞特性：

1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。
MR/FITC 荧光素标记盐皮质受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

 Tubulin- Beta/FITC 荧光素标记微管蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh 5-HTR1B 5-羟色胺受体1B抗体 规格 0.1ml

Mouse  rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml

GC1q R 英文名称： 透明质酸结合蛋白1抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh PTGEs 前列腺素E合成酶抗体 规格 0.1ml

 Tubulin- Beta/FITC 荧光素标记微管蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

CNTF ELISA Kit 大鼠睫状神经营养因子Multi-class antibodies规格： 48T

 Bax(phospho Ser184) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠等磷酸化Bax抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ESRRG/Estrogen Related Receptor gamma 雌受体相关蛋白3抗体 规格 0.2ml

ACV-A (Mouse Activin A) ELISA Kit 小鼠活化素A 96T

RNF62 英文名称： 环指蛋白62抗体 0.2ml

AU1 tag 英文名称： AU1 tag标签抗体 0.1ml

 Bax(phospho Ser184) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠等磷酸化Bax抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rabbit  Avidin/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的兔抗亲和素 0.1ml

GPR125 英文名称： G蛋白偶联受体125抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh ACADL 酰基A脱氢酶长链抗体 规格 0.1ml

 MIP4/CCL18/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎症蛋白4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Avidin/Bio 生物素标记的兔抗亲和素 规格 0.1ml

 TP53/FITC 荧光素标记抗P53抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
小鼠角膜上皮细胞*培养基饮料果糖酶法定量检测试剂盒20次五加苷 E

糖果果糖酶法定量检测试剂盒20次姜酮

面食果糖酶法定量检测试剂盒20次广藿香酮

豆类半乳甘露糖比色法定量检测试剂盒20次黑芝麻

细胞培养基谷氨酰胺比色法定量检测试剂盒20次磺

食物添加剂谷氨酰胺比色法定量检测试剂盒20次奈韦拉平

果菜谷氨酰胺比色法定量检测试剂盒20次奥美拉唑钠

饮料谷氨酰胺比色法定量检测试剂盒20次L-苏甲酯盐酸盐

面食谷氨酰胺比色法定量检测试剂盒20次对基-β-D-吡喃葡萄糖苷

谷氨酰胺待测样品处理试剂盒20次羧肽酶A（牛胰）

魔芋葡甘露聚糖比色法定量检测试剂盒20次乙二乙酸二钾盐

凝胶软糖葡甘露聚糖比色法定量检测试剂盒20次钼酸钠

果菜D-葡萄糖酸盐比色法定量检测试剂盒20次磷钨酸钠

饮料D-葡萄糖酸盐比色法定量检测试剂盒20次重蒸酚

食物D-葡萄糖酸盐比色法定量检测试剂盒20次氯代癸烷