产品名称：椎间盘髓核细胞*培养基

规格：100mL/125mL×4
货号：YS-02X10070

细胞生长实验 ：细胞生长良好，形态正常

储存条件：2℃-8℃，避光储存

运输条件：冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备RPMI-1640 培养基；优质胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

注意事项：

（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；

（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。

（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。

（5）关于“慢冻”，传统的方法，LLC细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步骤：

一）准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。

（二）校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。

（三）过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。

（四）分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。

（五）灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。

细胞特性：

1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。
TGF- BetaR 3/FITC 荧光素标记转移生长因子–β受体3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

ATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化复制因子2(多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

富含半胱的酸性分泌蛋白抗体  SPARC 0.2ml

SRPK1 英文名称： 丝酸/苏酸蛋白激酶SRPK1抗体 0.2ml

Ephrin A3 英文名称： 酪酸蛋白激酶A3受体抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAP4K4(Ser631) 磷酸化原活化蛋白激酶MAP4K4抗体 规格 0.1ml

ATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化复制因子2(多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

 BGP/FITC 荧光素标记骨保护蛋白/骨钙素抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

 GLUT2/FITC 荧光素标记葡萄糖转运蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CK3 细胞角蛋白3抗体 规格 0.1ml

CULLIN (Cdc53/CUL) 0.5mg

SOX13 英文名称： 胰岛细胞抗原12/核转录因子SOX13抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh TRAF1 坏死因子受体相关因子1抗体 规格 0.2ml

 GLUT2/FITC 荧光素标记葡萄糖转运蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Goat  Mouse IgG/Cy5 Cy5标记的羊抗小鼠IgG 0.1ml

FAM70A 英文名称： FAM70A蛋白抗体 0.2ml

鼠抗人CD4单克隆抗体  CD4 0.2ml

 NRSF/REST/FITC 荧光素标记神经元抑制蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Plexin A1 神经丛蛋白A1抗体 规格 0.2ml

Biotin/HRP 辣根过氧化物酶标记生物素Multi-class antibodies规格： 0.1ml
椎间盘髓核细胞*培养基体液谷丙酮酸转氨酶（GPT）活性光谱法定量检测试剂盒20次人肽释放酶10（KLK 10）ELISA试剂盒,KLK 10 ELISA

通用型谷草酰乙酸转氨酶（GOT）活性光谱法定量检测试剂盒20次人酸性磷酸酶（ACP）ELISA试剂盒,

细胞谷草酰乙酸转氨酶（GOT）活性光谱法定量检测试剂盒20次人过氧化脂质/乳过氧化物酶（LPO）ELISA试剂盒,

组织谷草酰乙酸转氨酶（GOT）活性光谱法定量检测试剂盒20次人血管生长素（ANG）ELISA试剂盒,

血液谷草酰乙酸转氨酶（GOT）活性光谱法定量检测试剂盒20次人甘露糖受体（MR）ELISA试剂盒,

体液谷草酰乙酸转氨酶（GOT）活性光谱法定量检测试剂盒20次人凝血酶原（PT）ELISA试剂盒,

胆碱酯酶（CHE）活性比色法定量检测试剂盒20次人白三烯E4（LTE4）ELISA试剂盒,

乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒50次人促肾上腺皮质素（ACTH）ELISA试剂盒,

丁酰胆碱酯酶定量检测试剂盒20次小鼠瘦素（LEP）ELISA试剂盒,

铜蓝蛋白活性比色法定量检测试剂盒20次大鼠apelin 12（AP12）ELISA试剂盒,

血液α－淀粉酶活性CNPG3比色法定量检测试剂盒50次豚鼠卵清蛋白特异性IgG（OVA sIgG）ELISA试剂盒,

体液α－淀粉酶活性CNPG3比色法定量检测试剂盒50次6-氨基正己酸

医学生化分析试剂专题D-亮甲酯盐酸盐

名称规格N-乙酰-D-脯

总胆汁酸（TBA）定量检测试剂盒20次18B-甘草次酸 18-beta-Glycyrrhetinic acid