产品名称：小鼠骨肉瘤成骨细胞;K7M2 wt

规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
货号：YS-02X9877

细胞生长实验 ：细胞生长良好，形态正常

储存条件：2℃-8℃，避光储存

运输条件：冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备RPMI-1640 培养基；优质胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

注意事项：

（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；

（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。

（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。

（5）关于“慢冻”，传统的方法，LLC细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步骤：

一）准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。

（二）校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。

（三）过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。

（四）分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。

（五）灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。

细胞特性：

1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。
VWF/RBITC 红色罗丹明标记血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

CLCA4(Calcium-activated chloride channel 4) 钙激活氯离子通道4抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

5-羟色胺转运蛋白抗体  5-HTT/SERT 0.1ml

Septin 8 英文名称： 细胞分化蛋白SEPT8抗体 0.2ml

Phospho-HER2 (Tyr1221) 英文名称： 磷酸化HER2受体抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-FRAP1/mTOR(Ser2448) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗体 规格 0.1ml

CLCA4(Calcium-activated chloride channel 4) 钙激活氯离子通道4抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Ghrelin(Human) 人脑肠肽Multi-class antibodies规格：48

 CPT1A 肉毒碱棕榈酰基转移酶1A抗体Multi-class antibodies规格： 1ml

Rhesus antibody Rh NMDAR2B 谷受体2B抗体 规格 0.1ml

Human dynamin 2,DNM2 ELISA Kit 人发动蛋白2 96T

TEM8 英文名称： 血管内皮标志物8抗体 0.2ml

Placental lactogen I+II 英文名称： 胎盘催乳素1/2抗体 0.2ml

 CPT1A 肉毒碱棕榈酰基转移酶1A抗体Multi-class antibodies规格： 1ml

Goat  rabbit IgG/APC APC标记的羊抗兔IgG 0.1ml

FMO3 英文名称： 二甲基胺单加氧酶3抗体 0.2ml

抗麻疹病毒抗体  Measles virus of fusion protein 0.1ml

 phospho-PAK3(pSer139)/FITC 荧光素标记抗磷酸化p21激活激酶3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Stat2 (Tyr690) 磷酸化信号转导和转录激活因子2抗体 规格 0.1ml

Goat  Bovine IgG 羊抗IgG (亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格： 1mg
小鼠骨肉瘤成骨细胞;K7M2 wt通用型DNA损伤彗星检测试剂盒20次人网膜素（omentin）ELISA试剂盒,

通用型DNA损伤彗星检测*试剂盒（荧光染色）20次人抑制酸性蛋白（IAP）ELISA试剂盒,

通用型DNA损伤彗星检测*试剂盒（银染）20次小鼠热休克因子1（HSF1）ELISA试剂盒,

DNA损伤彗星中性检测*试剂盒（荧光染色）20次小鼠抗中性粒/中心体抗体（ACA）ELISA试剂盒,

DNA损伤彗星中性检测*试剂盒（银染）20次大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白（Bid）ELISA试剂盒,

过氧化氢处理DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20次大鼠碳酸酐酶2（CA-2）ELISA试剂盒,

内切核酸酶III处理DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20次大鼠游离脂肪酸（FFA）ELISA试剂盒,

FGP处理DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20次大鼠组蛋白H2b（histon-H2b）ELISA试剂盒,

紫外线处理DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20次大鼠脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PL-A2）ELISA试剂盒,

细胞DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20次大鼠基质金属蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）ELISA试剂盒,

细胞DNA损伤彗星*荧光检测试剂盒20次大鼠腺来源的血管内皮生长因子（EG-VEGF）ELISA试剂盒,

组织DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20次鸭白介素8（IL-8/CXCL8）ELISA试剂盒,

组织DNA损伤彗星*荧光检测试剂盒20次猴B病（BV）ELISA试剂盒,

植物组织DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20次山羊P选择素（P-Selectin/CD62P/GMP140）ELISA试剂盒,

植物组织DNA损伤彗星*荧光检测试剂盒20次兔子血栓调节蛋白（TM）ELISA试剂盒,