产品名称：NADP苹果酸酶（NADP-ME）测试盒说明书

规格 : 50管/48样、100管/96样

测试方法:微量法、紫外分光光度法

货号：YS-01S6339

测定意义

ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中，尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应，产生丙酮酸和CO2，以及伴随NAD(P)+的还原反应，是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多，已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同，可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。

测定原理：

NADP-ME催化NADP+还原成NADPH，在340nm下测定NADPH增加速率。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

样品制备：

1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。

2）. 过滤混浊溶液。

3）. 除去样品中的CO 2 。

4 ）. 加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。

5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。

6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。

8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。

10）.含脂肪的样品用热水提取。

操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

特点:

(1)应用广泛

由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)灵敏度高

由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。

(3)选择性好

目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。

(4)准确度高

对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。

(5)适用浓度范围广

可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。

(6)分析成本低、操作简便、快速

Anti-PDGF-BB/FITC 荧光素标记血小板源性生长因子-BB抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rabbit Anti- guinea pig IgM/FITC 荧光素标记兔抗豚鼠IgMMulti-class antibodies规格： 0.3ml

死亡受体4抗体 Anti-DR4/APO2/TRAILR1 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗马IgM 0.1ml

FBXO7 英文名称： F-box蛋白家族FBXO7抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151) 磷酸化CREB转录共激活因子TORC1抗体 规格 0.1ml

Rabbit Anti- guinea pig IgM/FITC 荧光素标记兔抗豚鼠IgMMulti-class antibodies规格： 0.3ml

SIP1 peptide 运动神经元存活蛋白结合蛋白1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-Bim 细胞死亡调解子抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PGGT1A/FNTA 蛋白香叶烯基转移酶1α抗体 规格 0.2ml

Flt-1/VEGFR1 浓缩液 0.1ml 进口分装

Urocortin 3 英文名称： 尿皮质素UCN3抗体 0.1ml

CCL24 英文名称： 嗜酸粒细胞趋化蛋白24抗体 0.2ml

Anti-Bim 细胞死亡调解子抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

phospho-SYN1(Ser549) 英文名称： 磷酸化神经突触素1抗体 0.1ml

Ephrin B 英文名称： Ephrin B抗体 0.1ml

转录因子7类似物2抗体 anti-TCF7L2 0.2ml

Anti-Phospho-TLK1 (Ser695)/FITC 荧光素标记磷酸化调节染色体组装激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-LKB1(Ser334) 磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抗体 规格 0.1ml

NT-3 神经生长因子-3(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
NADP苹果酸酶（NADP-ME）测试盒说明书安石榴甙（标准品）牛大力（美丽崖豆藤） 石蜡切片组织PP2A蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒

盐酸罗格列酮皂角 PP2A蛋白表达比色法定量检测试剂盒

γ-氨基丁酸(GABA) 鹿衔草 PP2A蛋白表达荧光定量检测试剂盒

γ-氨基丁酸(GABA),标准品番石榴叶 PP2A蛋白表达西方杂交分析试剂盒

澳洲茄边碱（标准品）矮地茶PP2A蛋白共沉淀分析试剂盒

澳洲茄碱（标准品）槐角PP2A蛋白表达ELISA定量检测试剂盒

安格洛苷 C（标准品）藤黄 IKB-ALPHA蛋白表达流式仪检测试剂盒

托瑞米芬八角麻载玻片IKB-ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒