ATCC 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
细胞名称 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC培养
形态特性 上皮样
品牌 贴壁生长
特征特性
培养条件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3~1:6传代,3~4天换液1次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:13;D13S317:11;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:14;D21S11:30;D2S1338:19,23;D3S1358:15,17;D5S818:12;D7S820:10,12;D8S1179:12,14;FGA:24;TH01:9.3;TPOX:10,11;vWA:15,17;
同工酶
染色体
使用权限 B类
人胰腺腺泡上皮癌;HPAC培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-Tumstatin/Col4a3/FITC 荧光素标记抑素抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
CBP(CREB-binding protein) CREB结合蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体 Anti-phospho-CaMK2a 0.1ml
SDHA 英文名称: 琥珀酸脱氢酶复合体亚基A抗体 0.1ml
E.coli DH-5 Alpha 英文名称: DH5α大肠杆菌菌体蛋白抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HSP27 (Ser15) 磷酸化热休克蛋白27抗体 规格 0.1ml
CBP(CREB-binding protein) CREB结合蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
TSA(Human tumor specific antigen) ELISA Kit 人特异性抗原Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-HHV8/ORF K2 人类疱疹病毒8抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MFGE8/BA46 上皮细胞抗原BA46抗体 规格 0.2ml
L-LDH(Human L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人L-乳酸脱氢酶 96T
RNF211 英文名称: 环指蛋白211抗体 0.2ml
CYP51A1 英文名称: 羊毛甾醇14α-去甲基化酶蛋白抗体 0.2ml
Anti-HHV8/ORF K2 人类疱疹病毒8抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
人BMX非受体络氨酸激酶(BMX)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)ELISA试剂盒,英文名:P-PKB ELISA Kit人白介素4受体(IL4R/CD124)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠白介素21(IL21)ELISA试剂盒,英文名:IL21 ELISA Kit人白介素18(IL-18)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠CD14分子(CD14)ELISA试剂盒,英文名:CD14 ELISA Kit人白细胞免疫球蛋白样受体亚科B成员1(LILRB1)ELISA试剂盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠孕酮受体(PROGR)ELISA试剂盒,英文名:PROGR ELISA Kit人CDK活化激酶装配因子MAT1(MNAT1)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL大鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒,英文名:PAP ELISA Kit人肌球蛋白轻链激酶(MYLK)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒,英文名:Hsp-60 ELISA Kit人NAD(P)H脱氢酶醌1(NAD(P)H dehydrogenase [quinone] 1)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒,英文名:B7-2/sCD86 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Complement component C9小鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒,英文名:TIMP-3 ELISA Kit人 2',5'-寡腺苷酸合成酶2(OAS2)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠胱抑素SA(CST2)ELISA试剂盒,英文名:CST2 ELISA Kit人PDZ和LIM域蛋白1(PDZ and LIM domain protein 1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠促甲状腺激素(TSH)ELISA试剂盒,英文名:TSH ELISA Kit人催乳素(PRL)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠Toll样受体4(TLR-4)ELISA试剂盒,英文名:TLR-4 ELISA Kit人络丝蛋白(Reelin)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠组蛋白乙酰基转移酶1(HAT1)ELISA试剂盒,英文名:HAT1 ELISA Kit人血清反应因子(SRF)ELISA试剂盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠纤维蛋白原α(FGα)ELISA试剂盒,英文名:FGα ELISA Kit人克拉拉细胞磷脂结合蛋白(CC10)ELISA试剂盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠趋化因子C-X-C-基元配体16(CXCL16)ELISA试剂盒,英文名:CXCL16 ELISA Kit
抗体稀释液 10ml/100ml pH7.2
Versican 英文名称: 蛋白聚糖Versican抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Tyr245) 磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体 规格 0.1ml
Laminin Beta1 peptide 层粘连蛋白β1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
phospho-DOK1(Tyr362) 英文名称: 磷酸化D酪酸激酶衰减蛋白1抗体 0.1ml
Anti-phospho-ALK/CD246 (Tyr1604) 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
VCL(Human vinculin) ELISA Kit 人纽蛋白Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷酸化p21激活激酶1/2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HPR 结合珠蛋白相关蛋白抗体 规格 0.2ml
Ach ELISA Kit 大鼠乙酰胆碱 96T
Phospho-PKR (Thr446 + Thr451) 英文名称: 磷酸化蛋白激酶R抗体 0.1ml
Cryptochrome 1 英文名称: 隐花色素蛋白1抗体 0.2ml
Anti-Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷酸化p21激活激酶1/2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml