ATCC 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
细胞名称 散鳞镜鲤尾鳍细胞;YZ21培养
形态特性 上皮细胞样
品牌 贴壁生长
特征特性 散鳞镜鲤尾鳍细胞由长江水产所建立鉴定,用于散鳞镜鲤尾鳍鱼基础研究和病毒疾病防治研究。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,2-3天传一代
传代情况 C14
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
散鳞镜鲤尾鳍细胞;YZ21培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-Cyclin C/FITC 荧光素标记周期素C抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-L-HDC /FITC 荧光素标记L-组氨酸脱羧酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh caspase-3 p12 subunit 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗体 规格 0.1ml
EPOR peptide 红细胞生成素受体抗原 0.5mg
HECT E3 ubiquitin ligase 英文名称: HECT E3泛素链接酶抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh SIRT5 沉默调节蛋白5抗体 规格 0.2ml
Anti-L-HDC /FITC 荧光素标记L-组氨酸脱羧酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
IL-7Ra/CD127 peptide 白细胞介素-7受体a抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-AEG-1 AEG-1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Cdc25B (Ser323) 磷酸化细胞分裂周期蛋白25B抗体 规格 0.1ml
中性树胶 100ml 进口原料
Phospho-Wee1(Ser53) 英文名称: 磷酸化WEE1蛋白抗体 0.1ml
DYX1C1 英文名称: DYX1C1蛋白抗体 0.2ml
Anti-AEG-1 AEG-1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗人IgM 0.1ml
GPR180 英文名称: G蛋白偶联受体GPR180蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Alpha-Synuclein/Syn/SNCA 核突触蛋白α抗体 规格 0.1ml
Anti-Kif14 protein /FITC 荧光素标记驱动蛋白家族Member14蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Guinea pig IgM/PE PE标记的兔抗豚鼠IgM 规格 0.1ml
Anti-Phospho-SirT1 (Ser27)/FITC 荧光素标记磷酸化沉默调节蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-phospho-Cyclin E(Thr62) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素E抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) /FITC 荧光素标记磷酸化单丝氨酸蛋白激酶1/2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Caspase-1(actived P10) 天冬氨酸-胱氨酸特异性蛋白酶家族抗体 规格 0.1ml
Emp1 (epithelial membrane protein 1) 表皮膜蛋白1抗原 0.5ml
HCST 英文名称: 造血细胞信号转导蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh SIPA1 信号诱导增殖相关蛋白1抗体 规格 0.2ml
Anti-Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) /FITC 荧光素标记磷酸化单丝氨酸蛋白激酶1/2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。