ATCC 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
细胞名称 人肺巨细胞癌高转移细胞株;PG-BE1培养
形态特性 上皮样
品牌 贴壁生长
特征特性 母系人肺巨细胞癌PG,单细胞克隆法分离鉴定得到的高转移细胞株;裸鼠体内成瘤率100%,肺转移率88%,淋巴转移率94%。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:
6传代;2~3天1次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
人肺巨细胞癌高转移细胞株;PG-BE1培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-USF-1/FITC 荧光素标记上游刺激因子1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
ANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
调节活化的正常T细胞表达和分泌的因子(趋化因子) Anti-CCL5/RANTES 0.1ml
SAP97 英文名称: 突触相关蛋白97抗体 0.2ml
E.coli 英文名称: 肠致病性大肠杆菌抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Histone H1(Thr146) 磷酸化组蛋白H1抗体 规格 0.1ml
ANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
TrxR(Mouse thioredoxin reductase) ELISA Kit 小鼠硫氧还蛋白还原酶Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-CBL2 /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Egr1 早期生长应答蛋白1抗体 规格 0.1ml
CR2/sCD21(Human Soluble Cluster of differentiation 21) ELISA Kit 人可溶性CD21 96T
Phospho-MYL(Ser19) 英文名称: 磷酸化肌球蛋白轻链2抗体 0.1ml
AF10 英文名称: 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗体 0.1ml
Anti-CBL2 /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
人2,5寡腺苷酸合成酶3(OAS3)ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA试剂盒,英文名:IKBα ELISA KiISA Kit for Human Heparin cofactor 2大鼠锚定蛋白重复域蛋白1(ANKRD1)ELISA试剂盒,英文名:ANKRD1 ELISA Kit人肿瘤坏死因子受体超家族成员12A(TNFRSF12A)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠肌球蛋白重链2(MYH2)ELISA试剂盒,英文名:MYH2 ELISA KiISA Kit for Human Transforming growth factor beta-3大鼠封闭蛋白3(CLDN3)ELISA试剂盒,英文名:CLDN3 ELISA Kit维生素A(Vitamin A)ELISA试剂盒通用96T0.156-10 ng/mL大鼠肠碱性磷酸酶(ALPI)ELISA试剂盒,英文名:ALPI ELISA Kit大鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒,英文名:αHSG ELISA Kit大鼠5-羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒,英文名:5-HT ELISA Kit
人磷脂酰肌醇-5-磷酸盐4-激酶2γ型(PIP4K2C)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL大鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒,英文名:PRL ELISA Kit豚鼠白介素5(IL5)ELISA试剂盒,英文名:IL5 ELISA KiISA Kit for Human AP-1 complex subunit mu-1小鼠孕酮受体(PROGR)ELISA试剂盒,英文名:PROGR ELISA Kit人金属肽酶含血小板反应蛋白9(ADAMTS9) ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠雄激素受体(AR)ELISA试剂盒,英文名:AR ELISA KiISA Kit for Human Arginase-1小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA试剂盒,英文名:Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit人双调蛋白(AREG)ELISA试剂盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒,英文名:ET-1 ELISA KiISA Kit for N(6)-Carboxymethyllysine小鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒,英文名:MIP-3β/ELC/CCL19 ELISA Kit
鸡血清蛋白干粉 10mg/50mg 国产
WAPL 英文名称: EBV核蛋白2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr198) 磷酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体 规格 0.1ml
IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
phospho-DDX58 (Ser8) 英文名称: 磷酸化DDX58抗体 0.1ml
Anti-Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) 磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Bid(Human BH3 interacting domain death agonist) ELISA Kit 人BH3结构域凋亡诱导蛋白Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-FLAG Tag(CT) FLAG Tag标签抗体(C端)Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MEF2A 肌细胞增强因子2抗体 规格 0.1ml
AChE(Human Acetylcholinesterase) ELISA Kit 人乙酰胆碱酯酶 96T
RAIDD 英文名称: CASP2凋亡相关蛋白抗体 0.1ml
C1orf177 英文名称: 1号染色体开放阅读框177抗体 0.2ml
Anti-FLAG Tag(CT) FLAG Tag标签抗体(C端)Multi-class antibodies规格: 0.1ml