ATCC 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;M619价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;M619价格
形态特性 多角
品牌 贴壁生长
特征特性 STR检测发现三株人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞C918、M619和Mum-2B为同一遗传背景,怀疑存在交叉污染。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;20mM Hepes
传代方法 1:
3传代;3~4天1次。
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:11;D16S539:8,12;D18S51:15;D19S433:13,14;D21S11:30;D2S1338:24,25;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:12;D8S1179:13;FGA:20,21;TH01:8,9.3;TPOX:11;vWA:16,17;
同工酶
染色体
使用权限 A类
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-TNK1/FITC 荧光素标记非受体型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
CCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta) 巨噬细胞炎性蛋白1β抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
碳酸酐酶2抗体 Anti-CA Ⅱ 0.1ml
SEMA4B 英文名称: 跨膜蛋白SEMA4B抗体 0.2ml
E2F1 英文名称: 转录因子E2F-1抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-HSF1(Ser307) 磷酸化热休克因子1抗体 规格 0.1ml
CCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta) 巨噬细胞炎性蛋白1β抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Trop-2/Tpm2 peptide 原肌球蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-CAP2 环化酶相关蛋白CAP-2抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PDE4A8 磷酸二酯酶4A8抗体 规格 0.2ml
HA Kit Influenza 甲型流感 H1N1 (猪流感 2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配对抗体 ELISA
THYN1 英文名称: 胸腺细胞核蛋白1抗体 0.1ml
phospho-c-Jun(Ser63) 英文名称: 磷酸化原癌基因c-Jun抗体 0.1ml
Anti-CAP2 环化酶相关蛋白CAP-2抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
大鼠Apelin大鼠13蛋白(AP13)ELISA试剂盒,英文名:AP13 ELISA KiISA Kit for Human Mu-type opioid receptor大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒,英文名:Casp-9 ELISA KiISA Kit for Human Retrotransposon-derived protein PEG*鼠雌酮(E1)ELISA试剂盒,英文名:E1 ELISA KiISA Kit for Human Parathyroid hormone-related protein大鼠Toll样受体2(TLR-2)ELISA试剂盒,英文名:TLR-2 ELISA KiISA Kit for Human Reactive oxygen species modulator 1大鼠组蛋白H2B(H2B)ELISA试剂盒,英文名:H2B ELISA KiISA Kit for Human Sortilin-related receptor大鼠纤维蛋白肽A(FPA)ELISA试剂盒,英文名:FPA ELISA KiISA Kit for Human Pigment epithelium-derived factor大鼠亲环素B(CYPB)ELISA试剂盒,英文名:CYPB ELISA Kit
人P5C脱氢酶(P5C dehydrogenase)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒,英文名:TNFsR-Ⅰ ELISA KiISA Kit for Human Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B大鼠基质金属蛋白酶23B(MMP23B)ELISA试剂盒,英文名:MMP23B ELISA KiISA Kit for Human Tyrosine-protein kinase receptor Tie-1大鼠淀粉样蛋白β前体蛋白结合蛋白B3(APBB3)ELISA试剂盒,英文名:APBB3 ELISA Kit大鼠γ-分泌激活蛋白(γSAP)ELISA试剂盒,英文名:γSAP ELISA Kit豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒,英文名:OVA sIgE ELISA KiISA Kit for Human Axin-1小鼠胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)ELISA试剂盒,英文名:IGF-1R ELISA KiISA Kit for Human Alpha-1A adrenergic receptor小鼠酸性成纤维细胞生长因子(aFGF/FGF-1)ELISA试剂盒,英文名:aFGF/FGF-1 ELISA Kit
广谱非预染蛋白Marker分子量标准(5-250kDa) 2x250μl/100次 MBI原装
ZNF474 英文名称: 锌指蛋白474抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-DAXX (Ser213) 磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白抗体 规格 0.1ml
GATA-3(GATA binding factor 3) GATA结合蛋白3抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
phospho-DNA PKcs (Ser2612) 英文名称: 磷酸化DNA依赖性蛋白激酶抗体 0.1ml
EPHB2 EPHB2 / Hek5 兔单抗 (PE) Human
AFP-L2(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 2) ELISA Kit 人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-HDAC7 组蛋白去乙酰化酶7抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MK6 原活化蛋白激酶MKK6抗体 规格 0.1ml
ACP(Human Acid Phosphatase) ELISA Kit 人酸性磷酸酶 96T
ROR alpha 英文名称: 维相关孤儿受体α抗体 0.2ml
C1orf43 英文名称: 1号染色体开放阅读框43抗体 0.2ml
Anti-HDAC7 组蛋白去乙酰化酶7抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml