产品名称：人成骨细胞组织处理缓冲液
规格：100ml
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
Anti-phospho-Syndecan 4/FITC 荧光素标记抗磷酸化多配体聚糖4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-Phospho-RIP2 (Ser176) /FITC 荧光素标记磷酸化受体结合丝氨酸苏氨酸激酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ALT1 谷丙氨酸氨基转移酶1抗体 规格 0.1ml

Rabbit Anti-human sIgA/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗人分泌型IgA 0.1ml

GPRC5C 英文名称： G蛋白偶联受体GPRC5C蛋白抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Guinea pig IgM/RBITC 罗丹明标记的兔抗豚鼠IgM 规格 0.3ml

Anti-Phospho-RIP2 (Ser176) /FITC 荧光素标记磷酸化受体结合丝氨酸苏氨酸激酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
MAPKK1 (MAP kinase kinase 1) 原活化蛋白激酶激酶1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

人成骨细胞组织处理缓冲液Anti-Amphiphysin 神经元突触前膜蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-BRCA1(Ser1423) 磷酸化癌易感基因1抗体 规格 0.1ml

Tris缓冲液 50ml 10mM pH 10.0

Phospho-VASP(Ser157) 英文名称： 磷酸化血管扩张刺激磷蛋白抗体 0.1ml

DBF4B 英文名称： S期激酶活化蛋白DBF4B抗体 0.2ml

Anti-Amphiphysin 神经元突触前膜蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgM/Cy3 Cy3标记的兔抗大鼠IgM 0.1ml

GADD34 英文名称： 生长抑制DNA损伤基因34抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh APOC4/Apolipoprotein CIV 载脂蛋白C4抗体 规格 0.2ml

Anti-IL-6/FITC 荧光素标记白介素6抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit anti-MG IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗长爪沙鼠IgG 规格 0.1ml

Anti-PSAP/PAP/FITC 荧光素标记前列腺酸性磷酸酶抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
FGF-8/HBGF-8 (Fibroblast growth factor 8) 成纤维细胞生长因子-8/纤维母细胞生长因子-8 (抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-Phospho-c-Kit (Tyr703) 磷酸化原癌基因c-kit抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PASK/STK39 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶39抗体 规格 0.2ml

DLL4 Kit Human 人 DLL4 ELISA配对抗体 ELISA

TLE4 英文名称： B淋巴细胞基因1抗体 0.2ml

CK2 英文名称： 细胞角蛋白2抗体 0.1ml

Anti-Phospho-c-Kit (Tyr703) 磷酸化原癌基因c-kit抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入*培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入*培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。