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上海市所在地
需自配仪器:
1、酶标仪(比色测定波长为450nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、微量移液器
基本信息:
产品名称:糖原磷酸化酶a(GPa)紫外分光光度法
测试方法:紫外分光光度法
规格 :50管/48样
货号:YS-01S7062
测定意义
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。糖原的分解主要在GPa的催化下进行。
测定原理:
未添加激活剂时,GPa催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GPa活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
用途范围:仅供科研研究实验
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
下列是公司正在销售的产品:
兔神经营养因子3(NT-3)联吸附测定试剂盒油菜假单胞ADEI
兔性/通透性增加蛋白(BPI)联吸附测定试剂盒 弗兰克氏SMII (SWAI)
兔外信号调节激(ERK)联吸附测定试剂盒 腐皮壳BCUI
兔蛋白二硫化物异构A6(PDIA6)联吸附测定试剂盒短短芽胞杆BCUI
兔血小板膜糖蛋白IV (GP4/CD36)联吸附测定试剂盒洋葱青霉BSEMI (BSRDI)
兔线粒体超氧化物歧化2(SOD2)联吸附测定试剂盒新疆盐红BSEMI (BSRDI)
兔G蛋白偶联受体120(GPR120)联吸附测定试剂盒耐林丹黄杆MBII (BSRBI)
兔固酮(ALD)联吸附测定试剂盒 荧光假单胞PAGI (BSPHI)
兔载脂蛋白E(ApoE)联吸附测定试剂盒 腐皮镰孢PAGI (BSPHI)
兔血小板反应蛋白4(TSP-4)联吸附测定试剂盒 枯草芽孢杆TATI
兔间变性瘤激(ALK)联吸附测定试剂盒 东方伊萨酵母XAGI (ECONI)
兔乳脱氢B(LDHB)联吸附测定试剂盒 莱比托游动球BPLI
兔唾液淀粉α1(AMY1)联吸附测定试剂盒 热带假丝酵母BPLI
兔角膜蛋白(KERA)联吸附测定试剂盒中山乳芽胞杆中山亚种BSPPI (ALWI)
兔β淀粉样前体蛋白(βAPP)联吸附测定试剂盒猴头BSPPI (ALWI)
糖原磷酸化酶a(GPa)紫外分光光度法谷受体红藻离子5抗体Human IDH1(IsocitRate dehydrogenase [NADP] cytoplasmic) ELISA Kit鱼腥草染料法PCR鉴定试剂盒
棕榈酰转移GODZ抗体Human UBA2 ELISA Kit人维生D受体(VD R)Elisa测定试剂盒
G蛋白信号调节蛋白1抗体Human UBA5 ELISA Kit小鼠颗粒A(Gzms-A)Elisa测定试剂盒
G基丁受体β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗体Human UBA6 ELISA Kit小鼠胰岛(INS)Elisa测定试剂盒
G蛋白α抗体Human BAI3(Brain-specific angiogenesis inhibitor 3) ELISA Kit小鼠P物质受体(SP-R)Elisa测定试剂盒
G蛋白β样蛋白抗体Human TXNDC17 ELISA Kit大鼠血管内皮生长因子C(VEGF-C)Elisa测定试剂盒
通用转录因子GTF2B抗体Human TULP1 ELISA Kit猪C反应蛋白(CRP)Elisa测定试剂盒
磷化gp130抗体Human TUFT1 ELISA Kit鸡乙酰乙检测(ACAC)Elisa测定试剂盒
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。