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上海市所在地
需自配仪器:
1、酶标仪(比色测定波长为450nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、微量移液器
基本信息:
产品名称:糖原磷酸化酶b(GPb)紫外分光光度法
测试方法:紫外分光光度法
规格 :50管/24样
货号:YS-01S7064
测定意义
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。GPb在一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。
测定原理:
GP催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)时测定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)时测定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
用途范围:仅供科研研究实验
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
下列是公司正在销售的产品:
兔骨保护(OPG)联吸附测定试剂盒 大肠埃希氏BOXI (PSHAI)
兔端锚聚合1 (TNKS1)联吸附测定试剂盒蜡状芽孢杆BSESI (BME1580I)
兔软骨寡聚基质蛋白(COMP)联吸附测定试剂盒 母鸡乳杆BSEXI (BBVI)
兔糖原合成激3α(GSK3α)联吸附测定试剂盒三叶草根瘤BSEXI (BBVI)
兔血小板激活因子(PAF)联吸附测定试剂盒芽孢杆属BSHTI (AGEI)
兔白介16(IL-16)联吸附测定试剂盒香菇BSHTI (AGEI)
兔基质金属蛋白2(MMP-2)联吸附测定试剂盒*紫晶蜡蘑XCEI (NSPI)
兔Runt相关转录因子2(RUNX2)联吸附测定试剂盒白曲霉XCEI (NSPI)
兔辅肌动蛋白α2 (ACTN2)联吸附测定试剂盒小麦茎点霉XMII (ACCI)
兔周期依赖性激9(CDK-9)联吸附测定试剂盒 地衣芽胞杆XMII (ACCI)
兔神经纤维网蛋白1(NRP1)联吸附测定试剂盒胶孢ALOI
兔相关血浆蛋白2(PAPPA2)联吸附测定试剂盒四季腐霉BFUI (BCIVI)
兔L苯解(PAL)联吸附测定试剂盒 胶质芽孢杆(没有可以提供的)NMUCI (TSP45I)
兔中期因子(MK)联吸附测定试剂盒香菇PDII (NAEI)
兔接触蛋白2(CNTN2)联吸附测定试剂盒米根霉PDII (NAEI)
糖原磷酸化酶b(GPb)紫外分光光度法赤霉抗体Human UBC ELISA Kit胰岛受体底物-2抗体流式组化
鸟嘌呤核苷结合蛋白X抗体Human TTLL10 ELISA Kit髓鞘相关糖蛋白a/b抗体流式组化
GRAM结构域蛋白2抗体Human TWF1 ELISA Kit轴索过度生长抑制因子-B抗体流式组化
γ-谷酰转移轻链2抗体Human TUSC5 ELISA Kit核受体相关因子-1抗体流式组化
原钙粘蛋白γA1抗体Human TTRAP ELISA Kit阴离子转运蛋白-1(抗大、小鼠:XR0606R 抗人)IHC WB
G蛋白偶联受体70抗体Human TWIST1(Twist-related protein 1) ELISA Kit因子信号传导抑制蛋白1抗体流式组化
G蛋白偶联受体71抗体Human TUB ELISA Kit转甲状腺蛋白抗体流式组化
谷受体δ2/GluR-δ2抗体Human TWIST2 ELISA KitDL-半胱盐盐无物
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。