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实验方法步骤:
特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
储存条件:-20℃以下,有效期12个月。
参数规格:
货号:YS-01P6678
产品规格:48T 0.1PCR管
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
运输:低温
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 序列资源丰富,除公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
2,2,4-基-1,3-戊二 98%四丁基乙铵 97%大鼠周期D1(Cyclin-D1)免疫试剂盒
烯基溴化镁 1.0 M乙溶液3--2-甲基-1-烯 97%大鼠因子信号转导抑制因子3(SOCS-3)免疫试剂盒
正丁基化镁 2.0 M THF溶液甲基烯磺钠 99%大鼠因子信号转导抑制因子1(SOCS-1)免疫试剂盒
4,4'-二羟基联 97%氧化亚铜 AR,95.0%大鼠色P4502E1(CYP2E1)免疫试剂盒
乙基化镁 2.0M solution in THF硝铁(III) 九水合物 CP,98%大鼠色P450,家族7亚科A多肽1(CYP7A1)免疫试剂盒
异基化镁 2.0 M in THF氢氧化铁 CP大鼠色P450(CYP450)免疫试剂盒
异烯溴化镁溶液 0.5 M THF溶液四氧化三铁 97%大鼠色P450 3A4(CYP3A4)免疫试剂盒
吡啶-4- 94%草铁(II) CP,98%大鼠色P450 1A1(CYP1A1)免疫试剂盒
乙烯基溴化镁 1.0M in THF无水三化铁 ≥99.9% metals basis大鼠色C氧化(COX)免疫试剂盒
乙烯基镁 1.6 M in THF无水三化铁 AR,98%大鼠色C(Cyt-C)免疫试剂盒
溴乙烯 98%无水三化铁 ≥99.99% metals basis大鼠色b5 免疫试剂盒
二乙二丁 CP叔丁 AR,98%大鼠膜钙转运ATP1(ATP2B1)免疫试剂盒
乙二丁 光谱纯乙二 重蒸馏,≥99.5%大鼠角蛋白18-M65(CK 18-M65)免疫试剂盒
乙二丁 for HPLC-GC, ≥99.5% (GC)硫羟 GR,99.5%大鼠角蛋白18-M30(CK 18-M30)免疫试剂盒
乙二丁 GR,99.5%异 >98.0% (GC)(含100ppm BHT稳定剂)大鼠间粘附分子3(ICAM-3)免疫试剂盒
Bt基因核酸检测试剂盒48T 0.1PCR管2′-脱氧腺-5′-单磷二钠1,1,1-三(二基膦甲基)乙烷角蛋白14抗体
2-脱氧-D-核糖2,4-二-3-甲氧基甲神经NB3特定蛋白抗体
橙黄Ⅰ2,4-二-3-甲氧基甲促胃泌受体抗体
硼三正丁酯3-溴呋喃单克隆抗体
人周期D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒,Cyclin-D1 ELISA kit3-溴呋喃2号染色体开放阅读框72抗体
人血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒,VIP ELISA kit2,2-二-1,3-二甲基-咪唑烷间粘附分子3抗体
人同型半胱氨(Hcy)ELISA试剂盒,Hcy ELISA2-乙酰基吡染色质结合蛋白Cbx8抗体
人激肽释放1(KLK 1)ELISA试剂盒,2-乙酰基吡降钙抗体