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pNZ2122乳酸乳球菌 矢量，mcs XH，食品级

交货时间约 8 – 10天

订单号：    VS-ELV01300

单位尺寸：  10微克

供应商：    MoBiTec GmbH

运输：  逆转录

存储：  4°摄氏度

产品子类别：    乳球菌表达系统

图片：  pNZ2122.png

1引言

乳酸乳球菌和其他乳酸的组成型基因表达系统由荷兰NIZO食品研究公司开发的细菌易于操作且易于操作对于以下应用程序具有优势：

过量表达同源和异源基因用于功能研究和

获得大量的特定基因产物

代谢工程

适合蛋白质分泌

1.1乳酸乳球菌  MOBITEC专业代理

乳酸乳球菌是同型发酵细菌。它的主要功能是快速乳酸由糖产生酸。广泛具有的功能特征

乳球菌研究包括碳代谢，细胞外和细胞内蛋白水解系统，抗生素物质的产生及其与和抵抗噬菌体。许多乳酸乳球菌菌株的基因组信息是公开的可用。丰富的知识和经验导致了乳球菌的使用。

生物技术的几个领域，例如细菌和病毒抗原的表达通过粘膜免疫接种，人细胞因子产生及其他安全接种原位治疗的治疗剂，乳球菌作为细胞工厂的用途特定化合物的生产以及药品的中试生产（Mierau，2005年）。

1.2乳酸乳球菌质粒在其他革兰氏阳性细菌中的用途  MOBITEC专业代理

具有复制源于乳酸乳球菌的质粒可用于所有乳酸菌和在其他革兰氏阳性细菌中，例如枯草芽孢杆菌（Silke David，1989，AEM55：1483;克里斯·普拉特（Chris Platteeuw），1994，AEM 60：587。伊丽莎白·索维格（Elisabeth Sorvig），2005年，微生物学，151：2439; Indranil Biswas，2008，微生物学，154：2275）。

1.3密码子用法

直到近，密码子的使用还是一个重要的问题，在乳酸乳球菌中表达异源基因（DNA的GC含量为35-37％）。当一个基因供体生物与乳酸乳球菌密切相关，或者DNA GC含量与

与乳酸乳球菌相比，基因成功表达的可能性很高。如今，廉价，可靠的量身定制的DNA合成技术已经面世，对特定靶基因起源的限制，如已知氨基酸序列，可以设计与宿主密码子使用模式匹配的基因生物。除了一般的密码子优化外，还可以使用特定的密码表，例如高度表达的核糖体蛋白基因的密码子表，以进一步增加产品形成。

2个产品

2.1宿主菌株

乳酸乳球菌亚种。 creemoris MG1363乳品菌株NCDO712的无质粒子代。广泛使用的宿主菌株乳酸乳球菌的克隆和基因表达（Gasson，1983）。

乳酸乳球菌NZ3000

食品级选择的标准品系基于乳糖生长的能力。的通常存在于质粒中的乳糖操纵子已整合到

染色体和lacF基因被删除。 lacF基因的缺失使该菌株除非在质粒上提供lacF，否则无法在乳糖上生长（van Alen-Boerrigter andde Vos，未发布的数据； de Ruyter et al。，1996）。

乳酸乳球菌NZ1330

该宿主菌株是根据alr选择用于食品级表达系统的标记。它是通过删除alr基因（一种丙氨酸消旋酶编码基因）而产生的，在祖先菌株MG1363中。 alr基因的缺失导致营养缺陷

必需成分D-丙氨酸，表明该菌株无法在培养基上生长除非在质粒上提供了alr，否则无需D-丙氨酸即可将L-丙氨酸转化为D-丙氨酸。 alr基因可作为食品级补充标记（Bron等，2002）。

2.2质粒

所有质粒均基于pSH71滚环复制子（de Vos，1987）。MOBITEC

pNZ124：具有乳酸乳球菌多个克隆位点的通用广谱宿主克隆载体和其他乳酸菌；氯霉素选择； （Platteeuw等，1994）MOBITEC

pNZ2103：在宿主的控制下用于组成型基因表达的广泛宿主载体lacA启动子；用于转录融合；氯霉素选择； （Platteeuw等，1996）MOBITEC

pNZ2105：具有多个乳杆菌克隆位点的通用食品级克隆载体 MOBITEC

NZ3000；基于LacF的选择； （Platteeuw等，1996）MOBITEC

pNZ2122：在lacA控制下用于组成型基因表达的食品级载体乳酸乳球菌NZ3000的启动子；用于转录融合；基于LacF的选择；（Platteeuw等，1996） MOBITEC

pNZ2123：食品级载体；与pNZ2122相同，但具有多个克隆位点  基于LacF的选择； （Platteeuw等，1996） MOBITEC

pNZ2125：具有适用于基因的多个克隆位点的食品级克隆载体 表达到乳酸乳球菌菌株NZ1330中；基于alr的选择； （Platteeuw等，1996） MOBITEC

pNZ7021：在宿主的控制下用于组成型基因表达的广泛宿主载体  强启动子PpepN；氯霉素选择； （Wegkamp et al。，2007）该载体设计用于翻译融合。它包含pepN核糖体结合

位点（RBS）和起始密码子（ATG），然后是SphI位点，这对于没有自身核糖体结合位点的靶基因的克隆和起始密码子。MOBITEC

pNZ7025：在pepN控制下用于组成型基因表达的食品级载体发起人基于alr的选择； （Wegkamp et al。，2007）该载体还被设计用于如上所述的质粒的翻译融合。MOBITEC

pNZ7021  注意：重要的是要考虑为转录融合只能用于使用任何可能的克隆位点克隆具有自身核糖体结合位点和自身起始密码子的靶基因。但是，那设计用于翻译融合的表达载体同时提供启动子和翻译  起始区域，包括RBS和起始密码子的序列，后跟一个重要的克隆位点。在这种情况下，必须使用相应的限定的限制性位点，导致开放框在框内插入阅读框（ORF）。

所有质粒均从水中冻干。使用TE缓冲液或水重新配制质粒DNA。MOBITEC

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