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EDC（1-乙基-3-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐） Pierce一级代理

货号：:  22980

描述

Thermo Scientific Pierce EDC是一种可与羧基和胺反应的零长度交联剂。EDC先与羧基反应并形成胺反应性O-酰基脲脲中间体，该中间体与氨基迅速反应形成酰胺键并释放出脲脲副产物。中间体在水溶液中不稳定，因此两步偶联过程依赖于N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）来稳定。不能与胺反应将导致中间体水解，羧基再生和释放N-取代的尿素。副反应是N-酰基脲的形成，其通常限于位于蛋白质疏水区域的羧基。

Thermo Scientific No-Weigh产品是以预分装的形式提供的特殊试剂。预称重的包装通过消除小瓶的重复打开和关闭来防止试剂随时间的流逝和污染。这种形式可以每次使用新鲜的试剂瓶，从而避免了称量少量试剂的麻烦，并减少了对试剂稳定性的担忧。

EDC的特征：

• 反应性基团：碳二亚胺

• 反应目标：活化羧基与氨基（伯胺）结合

• 几种共轭策略 -EDC与目标基团单独反应或包括NHS或Sulfo-NHS以提高反应效率或稳定活性中间体，以便以后与胺反应

• 中性键-在羧基和胺之间形成中性酰胺键

• 水溶性试剂-直接添加在生理缓冲液中的反应

• 可溶性反应副产物 -易于洗涤可以与水或稀酸一起使用

• 高纯度结晶试剂 -用于产生高质量的活化衍生物

EDC的特性

•分子式：C 8 H 17 N 3 ·HCl

•分子量：191.7

•间隔臂长度：0Å

• CAS号：25952-53-8

•反应性基团：碳二亚胺

•反应性：在pH 4.7–6.0（佳）下与羧基形成活性中间体，然后该中间体与伯胺反应

1-乙基-3- [3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸盐（EDC或EDAC）为零长度的交联剂，用于将羧基偶联到伯胺上。该交联剂已用于多种应用中，例如在肽合成中形成酰胺键，将半抗原连接载体蛋白以形成免疫原，通过5'磷酸基团标记核酸并创建生物分子的胺反应性NHS-酯。EDC与羧基反应形成胺反应性O-acylisourea中间体。如果该中间体不遇到胺，它将水解并再生羧基。在N-羟基磺基琥珀酰亚胺（Sulfo-NHS）的存在下，EDC可用于将羧基转化为可与胺反应的磺基-NHS酯。这是通过将EDC与含羧基分子混合并添加Sulfo-NHS来实现的。

应用：

•结合肽和蛋白质之间的羧基和氨基

•将半抗原偶联免疫原性载体蛋白（例如，将肽与KLH连接）

•将肽抗原固定于亲和纯化抗体

•创建NHS活化，可与胺反应的标记化合物

•交联蛋白质到羧基包覆的珠子或表面

•用胺反应性的NHS酯活化纳米颗粒

•通过5'磷酸基团进行DNA标记（请参阅技术提示＃30）

产品参考：

交联剂应用指南-搜索该产品的文献参考

规格

生产线：       皮尔斯™

交联剂类型：       异双功能

贴标方法：    化学标签

反应性部分：       碳二亚胺

溶解度：       水

垫片：    短

数量：    5克

内容及储存

储存在-20℃。随附湿冰。

介绍

Thermo Scientific™EDC是一种与羧基和胺反应的零长度交联剂。 EDC先与羧基反应

并形成可与胺反应的O-酰基异脲中间体，该中间体可与氨基快速反应形成酰胺键，

释放异脲副产物（请参见“其他信息”部分）。中间体在水溶液中不稳定，

因此，两步偶联过程依赖于N-羟基琥珀酰亚胺来稳定化。1,2

胺将导致中间体水解，羧基再生并释放N-取代的尿素。在旁边

反应是形成N-酰基脲，通常限于羧基疏水基团中的羧基。

蛋白质1,3

使用EDC将半抗原与载体蛋白偶联的步骤

所需材料

•载体蛋白：2mg牛血清白蛋白（BSA），卵清蛋白（OVA）或匙孔血蓝蛋白（KLH）

•偶联缓冲液：0.1M MES（2- [N-吗啉代]乙烷磺酸），pH 4.5-5（产品编号28390）

•EDC：10毫克

•半抗原：1-2mg

•Thermo Scientific™Zeba™Spin脱盐柱（产品编号89891）或其他带有柱头的凝胶过滤柱

5-6K分子量截止

程序

1.将EDC平衡室温。

2.将2mg冻干的BSA，OVA或KLH加入200µL偶联缓冲液中。如果使用Thermo Scientific™Imject™

载体蛋白，用超纯水复溶。

3.在500µL偶联缓冲液中溶解2mg的肽或半抗原，然后将其添加到200µL的载体蛋白中

解。

4.对于BSA或OVA偶联，将10mg EDC溶于1mL超纯水中，并立即添加100μL

溶液载体-肽溶液。对于KLH偶联，将10mg EDC溶于1mL超纯水中，然后

立即将50µL的该溶液添加到载体-肽溶液中。如果沉淀，进一步减少EDC的量

发生。

5.在室温下反应2小时。

6.使用脱盐柱纯化结合物。如果将免疫原保存了几天以上，请无菌过滤

结合并储存在4°C或-20°C的无菌容器中。

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