维生素B12钴胺素ELISA试剂盒

iELisa维生素B12检测试剂盒

（C/N: CE2131）

--－北京中检维康生物技术有限公司

1. 概要

   维生素B₁₂又叫钴胺素，是唯义含金属元素的维生素。自然界中的维生素B₁₂都是微生物合成的，高等动植物不能制造维生素B₁₂。维生素B₁₂是唯义的一种需要一种肠道分泌物（内源因子）帮助才能被吸收的维生素。有的人由于肠胃异常，缺乏这种内源因子，即使膳食中来源充足也会患恶性贫血。植物性食物中基本上没有维生素B₁₂。它在肠道内停留时间长，大约需要三小时（大多数水溶型维生素只需要几秒钟）才能被吸收。维生素B₁₂的主要生理功能是参与制造骨髓红细胞，防止恶性贫血；防止大脑神经受到破坏。

2. 原理

   本试剂盒的测定是基于免疫学中抗原抗体特异性反应的原理而建立的。微孔板包被有VB₁₂抗原。加入VB₁₂抗体和VB₁₂标准品或样品提取液。标准品或样品中提取的VB₁₂能与酶标板上的VB₁₂包被原竞争性地结合定量的抗体，没有结合的抗体、标准品或样品中提取的VB₁₂在洗涤步骤中被除去。再加入酶标二抗与微孔中的VB₁₂抗体反应。洗涤除去没有反应的酶标二抗。加入底物溶液温育，酶标记物将无色的显色剂转化为蓝色的产物，加入终止液后颜色由蓝色转变为黄色，在450nm 处测量每孔的OD值。OD值与样品中的维生素B₁₂含量成反比。

3. 试剂盒组成

1)      包被有抗原的96 微孔板： 1 块（96 孔，12 条×8 孔）

2)      维生素B₁₂标准品：0ng/mL；0.5ng/mL；4.0ng/mL；10ng/mL；50ng/mL1瓶 × 1.0mL

3)      VB₁₂抗体工作液：            1 瓶 × 10mL

4)      酶标二抗：                  1 瓶 × 15mL

5)      10× 浓缩洗涤液：             1 瓶 × 50mL

6)      稀释缓冲液：                 1 瓶 ×50mL

7)      显色底物：                   1 瓶 ×13mL

8)      终止液：                    1 瓶 × 7mL

  9）  试剂盒说明书:      

测定之前注意事项

使用前将所有试剂平衡至室温（20-25℃）。

 使用后迅速将试剂放入2-8℃冷藏。

 在ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性，正确的洗板操作是ELISA测定程序中的要点。

 所有温育过程应避免阳光直射，并按要求用盖板覆盖住酶标板。

注意事项

1)      室温低于20℃或试剂及样品未回到室温（20- 25℃）会导致数值偏低。

2)      在洗板过程中如果出现板孔干燥过久的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3)      标准物质和显色液对光敏感，避免直接暴露在光线下。

4)      混合要均匀，洗板要*（包括加样品和标准液的时候都必需充分混合均匀）。

5)      终止液为强酸性物质，避免接触皮肤。

6)      不要使用过了有效期的试剂盒，也不要使用不同批次的试剂盒，这样会引起测定误差。

7)      试剂盒的储存条件是2~8℃，切勿冷冻。

维生素B12钴胺素ELISA试剂盒