小鼠结肠癌细胞荧光素酶标记 CT26+LUC  

细胞名称：小鼠结肠癌细胞荧光素酶标记

培养条件：1640+10%FBS+1%P/S    

生长状态：贴壁生长

人子宫内膜腺癌细胞 HEC-1-A McCOY'S 5A+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人子宫内膜腺癌细胞 HEC-1-A McCOY'S 5A+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人子宫膜腺癌细胞 HEC-1-B MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人胚肾细胞 HEK-293（293） MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁+悬浮生长

人胚肾细胞HEK-293细胞稳转株（KCNA5（human NaV1.5-egfp） HEK-293+EGFP MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁+悬浮生长

人胚肾细胞 HEK-293A DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁+悬浮生长

人红白细胞白血病细胞 HEL 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人子宫颈癌细胞 HELA MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人宫颈癌细胞荧光素酶标记 HELA+LUC   MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人宫颈癌细胞 chang liver  MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人宫颈癌细胞 HeLa.S3 F12K+10%FBS+1%P/S   贴壁生长

人肝癌细胞 hepg2.2.15 MEM+10%FBS+0.38mg/ml G418+1%P/S 贴壁生长

人肝癌细胞 Hep3B2.1-7 [Hep3B] MEM+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%P/S 贴壁生长

人肝癌细胞 HEPG2 MEM+10%FBS+1%P/S   贴壁生长

人肝癌细胞+GEP hepG2+GFP MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人肺成纤维细胞 HFL1 F12k+10%FBS+1%PS 贴壁生长

人 SV40  转染成骨细胞 HFOB1.19 DMEM/F12+10%FBS+0.3mg/ml G418+1%P/S 33.5℃ 贴壁生长

人胃癌细胞 HGC-27 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人肾皮质近曲小管上皮细胞 HK-2 角质无血清培养基（D-KSFM 推荐：iCell-019） 贴壁生长

人肾上皮细胞 HKb-20 DMEM+10%FBS+800μg/ml G418+1%P/S 贴壁生长

人早幼粒白血病细胞 HL 60（hl-60） IMDM+20%FBS+1%P/S   悬浮生长

人肝细胞 HL-7702[L-02] 1640+20%FBS+1%P/S 贴壁生长

人小胶质细胞 HMC3 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人高转移卵巢癌细胞 HO-8910PM 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人骨肉瘤细胞 HOS MEM+10%FBS+1%NEAA+1%P/S 贴壁生长

人胰腺癌细胞 HPAC D/F12+5%FBS+0.002mg/ml胰岛素+0.005mg/ml转铁蛋白+40ng/ml氢化的松+10ng/ml表皮生长因子EGF +1%P/S 贴壁生长

人胎盘细胞（有限细胞系） Hs 815.Pl DMEM+10%FBS+1%P/S   贴壁生长

人乳腺癌细胞 HS578T DMEM+0.01mg/ml牛胰岛素+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人脑胶质瘤细胞 HS683 DMEM+15%FBS+1%P/S   贴壁生长

人真皮成纤维细胞（原代细胞永生化） HSF(SV40) D/F12+10%FBS+1%p/s+0.005mg/ml胰岛素+5ng/mlBfGF+1ug/ml氢化的松+50ug/ml抗坏血酸（维C）+7.5mM L-Gln (推荐：PriMed-iCell-003) 贴壁生长

人纤维肉瘤细胞 HT-1080 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人膀胱癌细胞 HT-1376 MEM+10%FBS+1%P/S   贴壁生长

人结肠癌细胞 HT-29 (HT29) McCOY's 5A +10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人眼小梁网细胞 HTMC DMEM/F-12+15%FBS+1%P/S 贴壁生长

人胰腺导管细胞 HPNE 75%DMEM(无糖)+25%Medium M3 +5%FBS+10ng/mlrh EGF+2.5mM D-葡萄糖+750 ng/ml 嘌呤霉素+1%P/S 贴壁生长

人肝母细胞瘤细胞 HUH-6 DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS +1%P/S 贴壁生长

人肝癌细胞 huh-7 DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS +1%P/S 贴壁生长

人肝癌细胞 huh-7.5.1 DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS +1%P/S 贴壁生长

人T淋巴细胞白血病细胞 HUT-78 IMDM+20%FBS+1%PS 悬浮生长

人十二脂肠腺癌 HUTU-80 MEM+10%FBS+1%P/S    贴壁生长

人脐静脉内皮细胞（原代细胞永生化） HUVEC 内皮细胞培养体系（PriMed-iCell-002） 贴壁生长

人脐静脉内皮细胞 HUV-EC-C 内皮细胞培养体系（PriMed-iCell-002） 贴壁生长

人脐静脉内皮细胞永生化+RFP HUVEC+RFP 内皮细胞培养体系（PriMed-iCell-002） 贴壁生长

人脐静脉内皮细胞永生化+GFP HUVEC+GFP 内皮细胞培养体系（PriMed-iCell-002） 贴壁生长

人诱导多能干细胞 iPS *培养基500ml++细胞消化液500ml+复苏专用因子1mg+matrix基质胶5ML 贴壁生长

人子宫内膜癌细胞 Ishikawa MEM+15%FBS+1%NEAA+1%P/S 贴壁生长

人正常卵巢上皮细胞系 IOSE-80（IOSE80;NFHIOSE-80;IOSE80UBC;IOSE-Van; IOSE-VAN） 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人胚肺成纤维细胞 IMR-90 MEM+20%FBS+1%P/S 贴壁生长

人急性T细胞白血病细胞 J.gamma1 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮生长

人膀胱移行细胞癌 J82 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人胎盘绒毛癌细胞 JAR 1640+10%FBS+1%丙酮酸钠+1%P/S 贴壁生长

人胰腺癌细胞 JF-305 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人绒毛膜癌细胞 JEG-3 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人T淋巴细胞白血病细胞 Jurkat（clone E6-1） 1640+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠+1%P/S 悬浮生长

人慢性骨髓性白血病细胞系 K562 IMDM + 10%FBS+1%P/S 悬浮+贴壁（少量）生长

人K562耐阿霉素细胞株 K562/ADR 1640+10%FBS+1%P/S+1ug/mlADR 悬浮+贴壁（少量）生长

人口腔表皮癌细胞 KB MEM+10%FBS +1%P/S 贴壁生长

人急性髓性白血病细胞 KG-1a IMDM + 10%FBS+1%P/S 悬浮生长

人卵巢颗粒细胞瘤细胞 KGN D/F12+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人脑胶质细胞瘤细胞 KNS-89 DMEM +10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人外周血嗜碱性白血病细胞 KU812 1640+10%FBS+1%P/S   悬浮生长

人食道癌细胞 kyse30 48%1640+48%F-12+2%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%P/S 贴壁生长

人肝癌细胞 Li-7 1640+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠+1%P/S 贴壁生长

人胶质瘤细胞 LN229 DMEM+5%FBS+1%P/S   贴壁生长

人前列腺癌细胞 LNCaP clone FGC 1640+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠+1%P/S 贴壁生长

人结直肠癌细胞 lovo F12K+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人结直肠癌细胞氟尿嘧啶耐药株 LOVO/5FU F12K+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人结直肠癌细胞荧光素酶标记 LOVO+LUC F12K+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人结直肠腺癌细胞 LS174T  MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人结直肠癌细胞 LS180 MEM+10%FBS+1%P/S 该细胞不能使用胰酶消化 贴壁生长

人结直肠癌细胞 LS513 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人肝星形细胞 LX-2 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

细胞培养注意事项：

一、污染防控

细胞培养最基本的是做好污染防控，包括微生物污染的防控和细胞系间交叉污染的防控。

实验中需保持良好的操作习惯，所用材料的位置摆放要顺手，污染源和已灭菌物品要分开放置。实验室也需定期清洁与消毒。

二、血清与培养基

通常血清的添加比例为10%，当然也可根据细胞状态和生长速率适当增加或减少添加比例。在更换血清品牌或者批次时，最好需对血清的品质进行验证，防止对实验造成影响。

对于培养基，目前商品化的比较成熟，稳定性也较好。如若需自配培养基时，过滤前搅拌时间不宜过长（培养基中营养丰富，细菌常温下20min就可繁殖一代，其代谢产物会对培养基的品质产生影响）。培养基过滤除菌后，应对培养基进行无菌验证，防止污染。

三、细胞培养瓶

目前商品化的细胞培养瓶主要为瓶盖是否带气孔两种。其中不带透气孔细胞培养瓶拧紧后需适当回旋瓶盖，保证CO₂能顺利进入细胞培养瓶。

细胞培养过程中，对于适应能力强的肿瘤细胞，可在传代3-4次后更换新的细胞培养瓶。对于非肿瘤细胞系如293T，HEK293等细胞，建议每次传代更换新的细胞培养瓶来保证细胞状态。

四、细胞传代

正常细胞形态较好，轮廓清晰，边缘透亮，细胞增殖状况良好。当贴壁细胞长到密度90%时，需进行传代。

传代时通常使用胰酶消化法。该方法又分为干消化法和湿消化法。

干消化法：胰酶浸润后弃去胰酶，待细胞变圆后加入新鲜培养基吹下后再进行细胞传代。

湿消化法：待细胞变圆，肉眼观察下成流沙状脱落时即可加入新鲜培养基终止消化，1000rpm离心5min,弃去上清，用新鲜培养基重悬传代。

吹打细胞时，手法要轻柔，避免吹打出气泡，造成细胞因内外压差破裂，同时需避免刮到瓶壁影响细胞的贴壁。

不同细胞的贴壁能力不同，消化时间不同；不同细胞细胞间连接强度不一样，消化时间不同；同一细胞生长状状况不同，消化时间不同。消化时适时观察细胞形态，避免因过度消化影响细胞活性。

       传代间隔时间和传代比例因细胞而异。细胞传代过程中，当细胞出现状态不好或者污染时及时弃去细胞，重新复苏。

五、细胞冻存与复苏

当细胞生长状况较好或者代数较早时，需及时大量的冻存。

细胞冻存液比例为培养基：血清：DMSO=7:2:1，也可血清：DMSO=9:1。细胞冻存密度通常为1-3×10⁶个/ml。细胞冻存采用慢冻方式，减少冰晶形成，避免细胞损伤。通常4℃放置0.5 h，-20℃放置2 h，-80℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。

细胞复苏时升温要快，防止在解冻过程中水分进入细胞，形成冰晶，影响细胞存活。38℃水浴不时摇动，在1分钟内使其*融化，1000rpm离心5min,弃去上清，用新鲜培养基重悬移入培养瓶中。

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