小鼠肾小球系膜细胞SV40-MES-13      

产品名称：小鼠肾小球系膜细胞

规格：1×10⁶  T25/瓶

培养条件：DMEM+10%FBS+1%P/S

生长状态：贴壁生长

相关细胞如下

小鼠肝实质细胞 AML-12 D/F12+10%FBS+1%ITS（10ug/mL胰岛素；转铁蛋白5.5ug/mL; 5ng/mL硒）+40ng/ml地塞米松+1%P/S 贴壁生长

小鼠气道平滑肌细胞 ASMC 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠脑神经胶质母细胞 G422 DMEM+10%FBS+1%P/S 悬浮生长

小鼠精原细胞系 GC-1 spg DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠主动脉内皮细胞 MAEC M199+5%FBS+5ng/ml VEGF+1%P/S 贴壁生长

小鼠骨样细胞 MLO-Y4 MEMa+5%FBS+5%小牛血清+1%P/S  鼠尾胶原包被 贴壁生长

小鼠肺上皮细胞 MLE-12 DMEM/F12+1%ITS（10ug/mL胰岛素；转铁蛋白5.5ug/mL; 5ng/mL硒）+10nM氢化的松+10nM雌二醇+10mM hepes+ 2mM L-谷氨酰胺+2%胎牛血清 贴壁生长

小鼠肾脏内髓集合管3上皮细胞 IMCD3 DMEM/F12+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠胚胎成纤维细胞 3T3-L1 DMEM（含NAHCO3 1.5g/L)+10%小牛血清+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸钠+1%P/S 贴壁生长

小鼠乳腺癌细胞 4T1 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠乳腺癌细胞荧光素酶标记 4T1+luc 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠巨噬细胞 Ana-1 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮生长

小鼠黑色素瘤细胞 B16 1640（或IMDM）+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠黑色素瘤细胞 B16-F10 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠黑色素瘤细胞荧光素酶标记 B16-F10+LUC DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠原B细胞株 BAF3 1640+10FBS+10ng/ml IL-3（鼠源）+1%P/S   悬浮生长

小鼠胚胎成纤维细胞 BALB/3T3 clone A31 DMEM+10%FBS+1%P/S  生长慢传代密度要大 贴壁生长

小鼠脑微血管内皮细胞株 bEnd.3 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S   贴壁生长

小鼠胰岛素瘤胰岛Beta细胞 Beta-TC-6 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+15%FBS+1%P/S   贴壁生长

小鼠小胶质细胞 BV2 DMEM+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1% HEPES+1%P/S 贴壁生长

小鼠神经干细胞 C17.2 DMEM+10%FBS +1%P/S 贴壁生长

小鼠成肌细胞 C2C12 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠胚胎成纤维细胞 C3H/10T1/2 Clone8   MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠结肠癌细胞 CT26 1640+10%FBS+1%P/S   贴壁生长

小鼠结肠癌细胞荧光素酶标记 CT26+LUC 1640+10%FBS+1%P/S   贴壁生长

小鼠结肠癌细胞 CT26.WT 1640+10%FBS+1%P/S   贴壁生长

小鼠胚胎干细胞 E14 DMEM+15%FBS+0.1uL/mL LIF+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸钠+1%PS+1uL/mLβ－巯基乙醇+1%P/S  培养瓶用0.1%明胶包被细胞呈集落生长 贴壁生长

小鼠淋巴瘤细胞 EL-4 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%马血清(或FBS)+1%P/S 悬浮生长

小鼠乳腺癌细胞 EMT6 1640+10%FBS+1%P/S   贴壁生长

小鼠胶质细胞瘤 GL-261 DMEM+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1% HEPES+1%P/S 贴壁生长

小鼠胶质细胞瘤荧光素酶标记 GL-261+luc DMEM+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1% HEPES+1%P/S 贴壁生长

小鼠乳腺上皮细胞 HC11 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠+1%P/S 贴壁生长

小鼠肝癌细胞 HEPA1-6 DMEM（含NaHCO3 1.5g/L+10%FBS+1%丙酮酸纳+1%P/S 贴壁生长

小鼠肝癌细胞荧光素酶标记 HEPA1-6+LUC DMEM（含NaHCO3 1.5g/L+10%FBS+1%丙酮酸纳+1%P/S 贴壁生长

小鼠海马神经元细胞 HT22 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠卵巢上皮癌细胞 ID8 DMEM+10%FBS+1%P/S   贴壁生长

小鼠单核巨噬细胞 J774A.1 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠骨肉瘤成骨细胞 K7M2WT (K7M2-wt) DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠骨肉瘤成骨细胞荧光素酶标记 K7M2WT(K7M2-WT)-LUC DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠肺癌细胞 LLC DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠肺癌细胞荧光素酶标记 LLC+LUC DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠淋巴瘤细胞 L5178Y TK+/- clone (3.7.2C) DMEM+10%FBS+1%P/S 悬浮生长

小鼠成纤维细胞 L929 MEM+10%HS(马血清）+1%P/S 贴壁生长

小鼠胰腺癌细胞 LTPA MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠乳腺癌高转移细胞 MA-891 1640+10% FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠膀胱癌细胞 MB49 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠结肠癌细胞 MC38 DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸钠+1% HEPES+1%P/S 贴壁生长

小鼠结肠癌细胞荧光素酶标记 MC38+LUC DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸钠+1% HEPES+1%P/S 贴壁生长

小鼠胚胎成骨细胞 MC3T3-E1 MEMα+10%FBS+1%P/S   贴壁生长

小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14 MC3T3-E1subclone 14 MEMα(添加NaHCO3 1.5g/L+肌醇 43.2mg/L+叶酸 8.82mg/L+β-巯基乙醇 7.8mg/L)+ FBS 10%+P/S 1% 贴壁生长

小鼠胚胎成纤维细胞 MEF D/F12+10%FBS+1%P/S  (非永生化) 贴壁生长

小鼠胚胎成纤维细胞 MEF(丝霉素C处理) D/F12+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠前胃癌细胞 MFC 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠正常肝细胞 NCTC1469（NCTC CLONE 1469） DMEM +10%马血清+1%P/S 贴壁生长

小鼠脑神经瘤细胞 neuro-2a MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

小鼠胚胎细胞 NIH/3T3 DMEM+10%小牛血清+1%NEAA+1%丙酮酸钠+1%L-谷氨酰胺+1%P/S 贴壁生长

小鼠骨髓基质细胞 OP9 MEMα+20%FBS +1%P/S 贴壁生长细胞培养体系（PriMed-iCell-002）

人诱导多能干细胞 iPS *培养基500ml++细胞消化液500ml+复苏专用因子1mg+matrix基质胶5ML

人子宫内膜癌细胞 Ishikawa MEM+15%FBS+1%NEAA+1%P/S

人正常卵巢上皮细胞系 IOSE-80（IOSE80;NFHIOSE-80;IOSE80UBC;IOSE-Van; IOSE-VAN） 1640+10%FBS+1%P/S

人胚肺成纤维细胞 IMR-90 MEM+20%FBS+1%P/S

人急性T细胞白血病细胞 J.gamma1 1640+10%FBS+1%P/S

人膀胱移行细胞癌 J82 MEM+10%FBS+1%P/S

人胎盘绒毛癌细胞 JAR 1640+10%FBS+1%丙酮酸钠+1%P/S

人胰腺癌细胞 JF-305 1640+10%FBS+1%P/S

人绒毛膜癌细胞 JEG-3 MEM+10%FBS+1%P/S

人T淋巴细胞白血病细胞 Jurkat（clone E6-1） 1640+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠+1%P/S

人慢性骨髓性白血病细胞系 K562 IMDM + 10%FBS+1%P/S

人K562耐阿霉素细胞株 K562/ADR 1640+10%FBS+1%P/S+1ug/mlADR

人口腔表皮癌细胞 KB MEM+10%FBS +1%P/S

人急性髓性白血病细胞 KG-1a IMDM + 10%FBS+1%P/S

人卵巢颗粒细胞瘤细胞 KGN D/F12+10%FBS+1%P/S

人脑胶质细胞瘤细胞 KNS-89 DMEM +10%FBS+1%P/S

人外周血嗜碱性白血病细胞 KU812 1640+10%FBS+1%P/S  

人食道癌细胞 kyse30 48%1640+48%F-12+2%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%P/S

人肝癌细胞 Li-7 1640+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠+1%P/S

人胶质瘤细胞 LN229 DMEM+5%FBS+1%P/S  

人前列腺癌细胞 LNCaP clone FGC 1640+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠+1%P/S

人结直肠癌细胞 lovo F12K+10%FBS+1%P/S

人结直肠癌细胞荧光素酶标记 LOVO+LUC F12K+10%FBS+1%P/S

人结直肠腺癌细胞 LS174T MEM+10%FBS+1%P/S

人结直肠癌细胞 LS180 MEM+10%FBS+1%P/S 该细胞不能使用胰酶消化

人结直肠癌细胞 LS513 1640+10%FBS+1%P/S

人肝星形细胞 LX-2 1640+10%FBS+1%P/S

人乳腺上皮细胞 MCF-10A MEGM kit（五管因子）+100ng/ml霍乱毒素（终止消化用刀豆蛋白酶）+1%P/S

人乳腺癌细胞 MCF-7 MEM+10%FBS+0.01mg/mL胰岛素+1%P/S

人乳腺癌阿霉素耐药细胞 MCF-7/Adr 1640+10%FBS+0.01mg/mL胰岛素+1%PS+500ng/mL ADR

人乳腺癌细胞荧光素酶标记 MCF-7+luc MEM+10%FBS+0.01mg/mL胰岛素+1%P/S

人乳腺细胞 MDA-KB2 L15+10%FBS +1%P/S

人乳腺癌细胞 MDA-MB-231 L15+10%FBS +1%P/S

人乳腺癌X细胞+GFP MDA-MB-231+GFP L15+10%FBS+1%P/S

人乳腺癌细胞荧光素酶标记 MDA-MB-231+LUC L15+10%FBS+1%P/S

人乳腺癌细胞 MDA-MB-361 L15+20%FBS+1%P/S

人黑素瘤细胞 MDA-MB-435S L15+10%FBS+0.01mg/ml胰岛素+0.01mg/ml谷胱甘肽+1%P/S

人乳腺癌细胞 MDA-MB-436 L15+10%FBS+0.01mg/ml胰岛素+16ug/ml谷胱甘肽

人乳腺癌细胞 MDA-MB-453 L15+10%FBS+1%P/S

人乳腺癌细胞 MDA-MB-468 L15 +10%FBS+1%P/S

人子宫颈表皮癌细胞 ME-180 MCCOY'S 5A+10%FBS +1%P/S  

人膜间皮细胞 MET-5A M199+NaHCO3 1.5g/L+3.3 nM EGF+400 nM 氢化的松+20 mM HEPES++1%ITS（10ug/mL胰岛素；转铁蛋白5.5ug/mL; 5ng/mL硒）+10%FBS+1%PS

人骨肉瘤细胞 MG63 MEM+10%FBS+1%P/S

人胃癌细胞 MGC-803 1640+10%FBS+1%P/S

人高转移性肝癌细胞 MHCC-97H DMEM+10%FBS+1%P/S

人高转移性肝癌细胞荧光素酶标记 MHCC-97H+luc DMEM+10%FBS+1%P/S

人高转移性肝癌细胞 MHCC-97L DMEM+10%FBS+1%P/S

细胞培养注意事项：

一、污染防控

细胞培养最基本的是做好污染防控，包括微生物污染的防控和细胞系间交叉污染的防控。

实验中需保持良好的操作习惯，所用材料的位置摆放要顺手，污染源和已灭菌物品要分开放置。实验室也需定期清洁与消毒。

二、血清与培养基

通常血清的添加比例为10%，当然也可根据细胞状态和生长速率适当增加或减少添加比例。在更换血清品牌或者批次时，最好需对血清的品质进行验证，防止对实验造成影响。

对于培养基，目前商品化的比较成熟，稳定性也较好。如若需自配培养基时，过滤前搅拌时间不宜过长（培养基中营养丰富，细菌常温下20min就可繁殖一代，其代谢产物会对培养基的品质产生影响）。培养基过滤除菌后，应对培养基进行无菌验证，防止污染。

三、细胞培养瓶

目前商品化的细胞培养瓶主要为瓶盖是否带气孔两种。其中不带透气孔细胞培养瓶拧紧后需适当回旋瓶盖，保证CO₂能顺利进入细胞培养瓶。

细胞培养过程中，对于适应能力强的肿瘤细胞，可在传代3-4次后更换新的细胞培养瓶。对于非肿瘤细胞系如293T，HEK293等细胞，建议每次传代更换新的细胞培养瓶来保证细胞状态。

四、细胞传代

正常细胞形态较好，轮廓清晰，边缘透亮，细胞增殖状况良好。当贴壁细胞长到密度90%时，需进行传代。

传代时通常使用胰酶消化法。该方法又分为干消化法和湿消化法。

干消化法：胰酶浸润后弃去胰酶，待细胞变圆后加入新鲜培养基吹下后再进行细胞传代。

湿消化法：待细胞变圆，肉眼观察下成流沙状脱落时即可加入新鲜培养基终止消化，1000rpm离心5min,弃去上清，用新鲜培养基重悬传代。

吹打细胞时，手法要轻柔，避免吹打出气泡，造成细胞因内外压差破裂，同时需避免刮到瓶壁影响细胞的贴壁。

不同细胞的贴壁能力不同，消化时间不同；不同细胞细胞间连接强度不一样，消化时间不同；同一细胞生长状状况不同，消化时间不同。消化时适时观察细胞形态，避免因过度消化影响细胞活性。

      传代间隔时间和传代比例因细胞而异。细胞传代过程中，当细胞出现状态不好或者污染时及时弃去细胞，重新复苏。

五、细胞冻存与复苏

当细胞生长状况较好或者代数较早时，需及时大量的冻存。

细胞冻存液比例为培养基：血清：DMSO=7:2:1，也可血清：DMSO=9:1。细胞冻存密度通常为1-3×10⁶个/ml。细胞冻存采用慢冻方式，减少冰晶形成，避免细胞损伤。通常4℃放置0.5 h，-20℃放置2 h，-80℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。

细胞复苏时升温要快，防止在解冻过程中水分进入细胞，形成冰晶，影响细胞存活。38℃水浴不时摇动，在1分钟内使其*融化，1000rpm离心5min,弃去上清，用新鲜培养基重悬移入培养瓶中。

细胞死亡术语：

失巢凋亡：贴壁细胞中的凋亡，由于缺乏基质互作导致的，可能是一个主要的抑癌机制。

凋亡，外在途径：胞外信号诱导的程序性细胞死亡，起始于跨膜受体(包括FAS)的连接反应。

凋亡，内在途径：程序性细胞死亡，可能依赖或不依赖caspase，特征是线粒体膜电位的改变。

自噬细胞死亡：细胞质液泡化，伴随胞质内容的无差别分解代谢。

铁死亡：铁依赖、非凋亡、氧化细胞死亡，由半胱氨酸吸收激发的。

坏死性凋亡：坏死的程序性形式，特征表现为当caspase-8被抑制时，TNFR1通过RIP1进行信号传递。

坏死：不成熟的细胞死亡，往往发生于感染或损伤。

依赖性细胞死亡：通过过量的聚合酶活性消耗ATP和NAD+。

部分拆除/角化：细胞结构和功能的久性修饰，通常依赖于caspase。比如红细胞摘除术、晶状体纤维的形成和表皮细胞角质化。

细胞焦亡：炎症条件下，caspase-1介导的凋亡，是机体一种重要的天然免疫反应，在抗击感染中发挥重要作用。

继发性坏死：凋亡发生后的坏死，通常见于细胞培养过程。

在日常培养过程中发现RAW264.7细胞容易出现的问题主要为以下几种：1.复苏不易成功2.细胞形态变异明显3.消化困难4.细胞生长缓慢，当你的细胞培养遇到上述瓶颈，不妨试一试以下几种解决办法。

1、复苏难以成功

原因：RAW264.7对空间十分敏感，复苏密度太高，细胞增殖太快，加剧细胞营养缺失，加速细胞老化。

解决办法：T75培养瓶复苏细胞数量控制在104~105

2、细胞变异明显

原因：细胞吞噬抗原过多、培养环境恶劣都会促使该细胞呈现梭形、长梭形

解决办法：改善细胞培养环境，例如与细胞接触的玻璃器皿均高温灭菌，换flask培养瓶，采用一次性器具，使用质量较高的胎牛血清

3、消化困难

原因：细胞老化后，细胞伪足多且长，使细胞难消化，使用胰酶或细胞刮会对细胞损伤较大

解决办法：无需胰酶使用吸管重复吹打，可消化大部分正常状态的细胞；但若细胞为“长脚”状态，即使加入胰酶消化超过10min，也难以消化下来，勉强消化，对后续的实验数据也有较大影响。

4、生长缓慢

原因：支原体污染会导致细胞生长缓慢，甚至难以贴壁

解决办法：定期进行支原体检测，如发现支原体污染，即刻使用支原体去除试剂

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