产品货号：S20202

产品规格：2×100ml

产品简介：

苏木素伊红（HE）染色试剂盒，简称 HE 染色，是病理学常规制片中基本的染色方法， 应用极其广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶，是一种碱性染色剂，它在 被氧化后生成苏木素，同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用，能够使细胞核染色。在病理诊断、教 学和科研工作中，常用 HE 染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。对于确定或鉴别病变组织、细 胞中出现的某些异常物质不特殊成分，而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法 等也均是在观察HE 染色组织切片的基础上进行的。在 HE 染色的组织切片中，细胞核呈蓝色，细胞浆呈 红色，二者形成鲜明的对比，易于观察分析。

苏木素染色液采用 尚宝生物 自主研发的配方，由进口的高纯度苏木 精、氧化剂等组成，不含甲醇等有害物质，对细胞核染色效果好。其特点是不易产生沉淀和金属; 应 用范围广，可以用于人、动物、畜牧、水产等领域，可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色 等；苏木素染色液可以重复使用。

染色原理：

1、细胞核染色的原理：

苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是 DNA，在 DNA双螺旋结构 中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易不带正电荷的苏木 素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

2、细胞浆染色的原理：

伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质，为两 性化合物，细胞浆的染色不染液的 pH 值密切相关。当染色液 pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7～5.0)以下时， 胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电 荷的阴离子，不胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。

3、分化作用：

染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为 分化液。在 HE 染色中常用 1%盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木素的醌型结构，使组织不色素分离 而退色。大多数组织经苏木素染色后，必须用 1%盐酸乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去，再进行伊红染色，才能保证细胞核不细胞浆染色的分明。

4、返蓝作用：

分化之后，苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色；在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝 色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色，立即用水除去组织切片上的酸而中止分化，再用弱碱性 水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核 返蓝，但所需时间较长。

产品组成：

自备材料：

1、盐酸乙醇分化液

2、蓝化液，如稀氨水、碳酸锂溶液等

3、系列乙醇

4、4%多聚甲醛

操作步骤:

(一)石蜡切片染色

1、切片脱蜡至水

①二甲苯作用 2 次，每次 5～10min。

②(可选)无水乙醇作用 2 次，每次 3～5min。

③95%的乙醇 3～5min

④90%的乙醇 3～5min

⑤80%的乙醇 3～5min

⑥自来水或蒸馏水 1～3min

2、染色

①苏木素染色液染色 5～8min

②自来水或蒸馏水冲洗 5～10s

③(可选)盐酸乙醇分化 2～5s

④自来水冲洗 20～30s

⑤蓝化液返蓝 20～40s

⑥自来水冲洗 30～60s

⑦伊红染色液染色 3～5min

⑧自来水冲洗 1～5s

2、脱水、透明、封固

①80%乙醇 10～20s

②90%乙醇 10～20s

③95%乙醇作用 2 次，每次 1～2min。

④无水乙醇作用 2 次，每次 2～3min。

⑤二甲苯透明 3 次，每次 2～3min。

⑥中性树脂封片。

染色结果：

细胞核呈蓝色；细胞质、肌纤维、胶原纤维、甲状腺胶质等呈深浅不一的红色；角蛋白、红细 胞等呈明亮的橙红色。

(二)冰冻切片染色

1、乙氧基乙烷混合固定液 5～10s

2、自来水冲洗 2～5s

3、苏木素染色液滴染 1～2min(可加热至 50℃)。

4、自来水冲洗 2～5s

5、(可选) 盐酸乙醇分化 2～5s

6、自来水冲洗 2～5s

7、蓝化液返蓝 2～5s

8、自来水冲洗 5～10s

9、伊红染色液染色 2～5s

10、自来水冲洗 1～2s

11、80%的乙醇 1～2s

12 、95%的乙醇 1～2s

13、无水乙醇 2～5s

14、苯酚二甲苯(1:3) 2～5s

15、二甲苯透明 3 次，每次 2～5s 16、中性树脂封片

备选方案：

1、无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗 2～3min。

2、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。

染色结果：

细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。