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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来生命科学领域最为重大的发现之一,被《Science》杂志评为2001年的**科学进展之一,并名列2002年**科学进展**。它是指小分子双链 RNA可以特异性地降解同源mRNA,从而抑制或关闭特定基因表达的现象。人们只要知道了某种疾病的致病基因,就可以设计出针对该基因mRNA的小分子干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA),抑制或封闭该致病基因的表达,从而达到治疗疾病的目的。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤等基因治疗领域。RNAi是目前最为热门的生命科学研究领域,也是未来最有发展前途的新药开发领域。除此之外,RNAi技术还可以广泛应用于农业、林业、畜牧业和渔业等多种领域,进行良种培育、良种筛选和疾病治疗等。
mRNA转染试剂导入细胞有以下几种方法∶化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。由于电转的方法对细胞损伤比较大,一般不建议选择电转。化学转染技术是目前最为常用的方法,化学转染能否成功的关键在于转染试剂的选择。
PolyShooter siRNA/miRNA 转染试剂(P09410)是一种基于阳离子高分子聚合物的新型转染试剂,适用于siRNA和miRNA的转染。其原理为带正电的高分子聚合物与siRNA/miRNA带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后,与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用,并通过内吞作用进入细胞,形成内含体。该转染试剂具有质子海绵的作用,能够吸收溶酶体中的H+,质子的不断流入导致复合体肿胀破裂,从而使外源siRNA或miRNA释放到细胞质中,实现siRNA/miRNA的细胞转染。
mRNA转染试剂(P09410)对多种常见细胞具有高水平转染效率,具有高效低毒、操作简单、重复性好等优点,适用siRNA/miRNA介导的基因抑制实验。其**的配方使其转染后无明显细胞毒性,因此无需去除转染试剂-核酸复合物或更换新鲜培养基,也可根据具体情况优化转染体系。