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基于动物细胞的表达平台能够生产复杂的生物分子,如重组蛋白和病毒载体。虽然大多数生物治疗药物是在动物细胞系中生产的,但在人类细胞系中的生产正在扩大。使用人类细胞系的一个重要优势是,由此产生的生物疗法将携带更多的“类人”翻译后修饰(PTMs)。在人类细胞系中,HEK293因其高转染率、快速生长速度和在无血清悬浮培养中生长的能力而被广泛应用。
HEK293细胞系是通过用剪切的腺病毒5型DNA转化人胚胎肾细胞而建立的,随后建立了许多亚型和衍生物,其中HEK293、HEK293-T和HEK293-F常用于生物制药的生产,HEK293-E和HEK293-6E常用于重组蛋白生产。HEK293易于转染性和相对较高的蛋白质生产力使其广泛应用于瞬时基因表达(TGE)、重组蛋白生产、病毒载体生产及大规模生物制品生产等领域。
PolyShooter 293Fit 转染试剂 (P09510)是一种非常经济和高效的主要用于贴壁生长的HEK293、HEK293T、HEK293A、293FT等293系列细胞的基于阳离子高分子聚合物的转染试剂。PolyShooterTM 293Fit 转染的原理是带正电的阳离子聚合物与核酸中带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后,再与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用,通过细胞胞吞进入细胞,随后在胞质中释放,实现外源核酸的细胞转染。
PolyShooter 293Fit 转染试剂 (P09510)对HEK293细胞的转染效率约80%以上,同时具有高效低毒、操作简单、重复性好等优点。其**的配方使其可直接加入培养基中,血清的存在不会影响转染效率,这样可以减少去除血清对细胞的损伤。同时,转染后不需要除去转染试剂-核酸复合物或更换新鲜培养基,也可根据具体情况优化转染体系。
PolyShooterTM 293Fit转染试剂也能用于其它贴壁细胞的转染,但转染效率远低于立谱沃生产的PolyShooterTM Transfection Reagent (P09110)和PolyShooterTM HP Transfection Reagent (P19110)。因此不太推荐使用PolyShooterTM 293Fit转染试剂用于293系列之外的细胞转染,仅当用于荧光素酶报告基因等检测灵敏度特别高的实验,并且用于一些比较容易转染的细胞时,才可以考虑使用PolyShooterTM 293Fit转染试剂。