细胞基因治疗(Cell and Gene Therapy, CGT)作为生命科学研究***的应用技术领域,在肿瘤、感染性疾病、神经系统疾病等多种疾病领域显示出巨大的应用潜力,正迅速发展。CGT产品研发和生产难度大、周期长、成本高,如何实现大规模、高质量、低成本、可重复的生产,已经成为CGT领域健康持续发展的挑战。因此,降低病毒载体的生产成本、顺利完成工艺放大来实现大规模生产与商业化,进一步提高细胞与基因治疗药物的可及性,是这一领域必然要解决的关键问题。
微量DNA转染试剂作为上游病毒扩增的重要原材料之一,是病毒生产的核心要素,决定了质粒用量、病毒得率和纯度,对病毒载体的产能具有重要影响。大规模生产上常用的转染方式有两种:磷酸钙转染法和PEI转染法(聚乙烯亚胺)。磷酸钙转染的优点为价格便宜,但缺点为效率非常低,并且误差很大,很难达到工艺的一致性,因此难以用于临床级病毒载体的生产。目前主流的方式为PEI转染法,PEI为阳离子聚合物,可以与带有负电荷的核酸结合从而形成复合体通过内吞作用进入细胞中,成本相对较适中。PEI决定了达到高转染效率时所需的质粒用量,PEI转染HEK293细胞时所需质粒用量≥2.5 μg/106个细胞,这决定了病毒生产时需要大量的质粒。选择高质量的转染试剂可以减少质粒用量,提高病毒生产效率,从而降低成本。
立谱沃生物经过多年的技术积累,开发出微量DNA高效转染试剂,PolyShooterTMTrace DNAMagic Transfection Reagent(P09610),可以帮助从事细胞基因治疗相关的广大企业实现降本增效。
微量DNA转染试剂(P09610)是一种基于阳离子高分子-脂质体复合物的新型转染试剂,兼具阳离子聚合物和脂质体的特性,专为使用微量DNA (<0.5µg/mL细胞培养物)增强瞬时基因表达(TGE)而设计,尤其适用于微量DNA的转染。其原理为利用脂质分子的疏水聚集组装特性增强阳离子高分子与负电核酸分子的结合形成在血清/培养基溶液中超高稳定性的复合物,同时利用阳离子高分子与细胞表面带负电的蛋白多糖的相互作用以及脂质分子与细胞膜之间的高亲和力,协同促进转染复合物进入细胞,随后在胞质中释放,实现外源核酸的细胞转染。
PolyShooter 微量DNA高效转染试剂(P09610)在大规模重组蛋白表达和病毒生产等领域有着高效、低毒、稳定、可靠等显著优势。其介导的转染过程可以轻松地从几毫升细胞培养物扩展到几升细胞培养物,确保强大的可重复蛋白质生产及病毒生产。更高的生产力和极低的DNA用量使其成为生物生产过程中经济高效的解决方案。