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分光光度法 50 管/24 样
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
锰过氧化物酶(EC1.11.1.13)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,主要存在于担子菌中,属于木质素降解酶系,能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物,叠氮化合物、DTT,多环芳烃等。
测定原理
锰过氧化物酶在 Mn2+存在的条件下,将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚,在 465nm 有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、震荡仪、甲苯。
试剂组成和配制
试剂一:液体 30mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂四:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。
样品处理
新鲜土样风干,过 30-50 目筛。
酶活计算公式酶活性定义:
每克土壤每分钟氧化 1nmol 愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。S-MnP 活性(nmol/min/g 土样)= dA×V 反总÷W÷T= 8.3×△ A÷Wε:愈创木酚摩尔消光系数:12100L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,1mL;W:样本质量,g;T:反应时间,10min土壤锰过氧化物酶(S-Mnp)测试盒