硫氧还蛋白氧化还原酶（TrxR）测试盒

分光光度法 50管/48样

 注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定

测定意义：

TrxR 是一种 NADPH 依赖的包含 FAD 结构域的二聚体硒酶，属于吡啶核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员，与硫氧还蛋白以及 NADPH 共同构成了硫氧还蛋白系统。TrxR 与 GR 活性类似，催化GSSG 还原生成GSH，是谷胱-甘肽氧化还原循环关键酶之一。

测定原理：

TrxR 催化 NADPH 还原 DTNB 生成 TNB 和 NADP+，TNB 在 412 nm 有特征吸收峰，通过测定 412nm 波长处 TNB 的增加速率，即可计算 TrxR 活性。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、低温离心机、可调节移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配制：

试剂一：液体 90mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 5 mL 蒸馏水溶

粗酶液提取：

1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（10⁴  个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1  的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7秒，总时间 3min）；然后 8000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。

3. 血清等液体：直接测定。

硫氧还蛋白氧化还原酶（TrxR）测试盒