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摘要:乙醇脱氢酶(ADH)大量存在于动物肝 脏、植物及微生物细胞中,是一种含锌金属酶,具有广泛的底物特异性。它 是一个质量为 80kDa 的二聚体,包括一组同工酶,这些同工酶都能够将乙醇 转化为乙醛。作为生物体内主要短链醇代谢的关键酶,它在很多生理过程中起着重 要作用。
样品收集、处理及保存方法:小鼠乙醇脱氢酶(ADH)ELISA检测试剂盒 活性
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
需要但未提供的材料及耗材:
1、酶标仪
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml量筒
7、无粉一次性乳胶手套
小鼠乙醇脱氢酶(ADH)ELISA检测试剂盒 活性储存条件及有效期:
1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期6个月。
2、开封使用后,包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中,密闭自封袋,并将全部试剂放回2-8℃冰箱。
3、开封后,按照建议的条件保存。(一个月内使用完)
操作注意事项:
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。