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【摘要】:集落刺激因子3(Colony-Stimulating Factor 3,简称CSF-3或G-CSF)是一种重要的促炎细胞因子,主要在人体内发挥促进中性粒细胞祖细胞和成熟中性粒细胞的存活、增殖、分化和功能的作用。它主要由单核细胞和巨噬细胞分泌,但也可由内皮细胞、成纤维细胞和骨髓基质细胞分泌。
人集落刺激因子3(CSF-3)ELISA检测试剂盒性能:
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:zui低检测浓度小于1.0 pg/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
实验材料与试剂配制:
1. 仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
2. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
样品收集、处理及保存:人集落刺激因子3(CSF-3)ELISA检测试剂盒
【细胞培养上清】:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
【血清】:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
【血浆】:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
【体液】:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
【样本要求】:样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
【样本保存】:如果样品不能立即检测,应将其分装,-80 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。