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【摘要】:磷酸二酯酶3A(Phosphodiesterase 3A,简称PDE3A)是一种重要的酶类,广泛参与细胞内的信号传导过程。PDE3A主要参与细胞内第二信使cAMP和cGMP的降解过程,通过调节这些信使分子的水平来影响细胞内的信号传导。PDE3A的活性受到多种因素的调节,包括磷酸化、与其他蛋白质的相互作用以及抑制剂的结合等。
人磷酸二酯酶3A(PDE3A)科研ELISA试剂盒组成及其配置:
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
实验材料与试剂配制:
1. 仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
2. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
样品收集、处理及保存:人磷酸二酯酶3A(PDE3A)科研ELISA试剂盒
【细胞培养上清】:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
【血清】:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
【血浆】:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
【体液】:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
【样本要求】:样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
【样本保存】:如果样品不能立即检测,应将其分装,-80 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。