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MicroRNA Mimic Negative Control

MCE 国际站：MicroRNA Mimic Negative Control

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-R04602

纯度：96.27%

存储条件：-20°C, sealed storage, away from moisture *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：MicroRNA Mimic Negative Control是 21个核苷酸的 miRNA 模拟物，可作为阴性对照使用。MicroRNA Mimic Negative Control 的序列是根据 cel-mir-239b的序列设计，这个序列是被广泛作为阴性对照使用。它与人类、小鼠和大鼠的miRNA具有最小的序列一致性。

体外：1. miRNA的配制 1.1 miRNA产品呈透明或半透明的干膜状附着在管壁上，使用前将试管瞬时离心，以确保 miRNA 位于试管底部。使用不含核酸酶的水重新配制 miRNA，得到20 μM的母液。 对于5 nmol miRNA：加入250 μL 无核酸酶水，涡旋振荡数次溶解。 对于20 nmol miRNA：加入1000 μL 无核酸酶水，涡旋振荡数次溶解。1.2 (可选) 将 miRNA 分装到一个或多个管子中以减少冻融的次数（1.3 将配制好的母液在-20℃或-80℃条件下保存。 2. 准备细胞 2.1 预先接种细胞，待达到合适的细胞密度时进行细胞转染。转染前细胞活力影响转染结果。 3. 转染 3.1 制备转染混合物A和B注：对于 miRNA mimics，我们推荐的工作浓度为 50nM。miRNA 产品最佳工作浓度因不同的细胞类型及研究目的而异，这取决于miRNA、细胞系和选择的分析方法。为了确定最佳结果的浓度，应该使用不同的浓度进行优化实验。优化后的浓度范围为 10~200nM。 6孔板的每孔：A: 245 μL无血清培养基+ 5 μL miRNA；B: 240 μL无血清培养基+ 10 μL HY-K2017 siRNA/miRNA Transfection Reagent 12孔板的每孔：A: 97.5 μL无血清培养基+ 2.5 μL miRNA；B: 95 μL无血清培养基+ 5 μL HY-K2017 siRNA/miRNA Transfection Reagent 24孔板的每孔：A: 48.75 μL无血清培养基+ 1.25 μL miRNA；B: 47.5 μL无血清培养基+ 2.5 μL HY-K2017 siRNA/miRNA Transfection Reagent 96孔板的每孔：A: 24.75 μL无血清培养基+ 0.25 μL miRNA；B: 24.5 μL无血清培养基+ 0.5 μL HY-K2017 siRNA/miRNA Transfection Reagent 如果使用其他品牌的转染试剂，需要根据具体情况调整转染试剂加入的量。3.2 将稀释好的 A 和 B 轻轻混合。室温孵育15-20分钟。3.3 从细胞中去除培养基，用 PBS 洗涤。3.4 向细胞中添加 miRNA-转染试剂混合物。 6孔板的每孔：加入1500 μL不含血清的新鲜培养基，然后加入500 μL的转染混合物 (A+B)，混匀。 12孔板的每孔：加入800 μL不含血清的新鲜培养基，然后加入200 μL的转染混合物 (A+B)，混匀。 24孔板的每孔：加入400 μL不含血清的新鲜培养基，然后加入100 μL的转染混合物 (A+B)，混匀。 96孔板的每孔：加入50 μL不含血清的新鲜培养基，然后加入50 μL的转染混合物 (A+B)，混匀。3.5 在37℃孵育细胞1-3天。然后分析转染细胞。可在转染约 6 小时后将无双抗和血清培养基更换为正常含血清和双抗培养基。注：转染时的培养基中不要加入抗生素，否则会降低细胞转染的效率，甚至导致细胞死亡。 MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

种属：Caenorhabditis elegans

销售产品：Rasagiline  | Afatinib (dimaleate)  | Nicotiflorin  | TAK-285  | Perindopril (erbumine)  | L-Lysine hydrochloride  | Baloxavir marboxil  | Sophocarpine  | KOdiA-PC  | (-)-p-Bromotetramisole (oxalate)

Trending products：Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Fluorescent Dye  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds  |  Oligonucleotides

参考文献：

[1]. Xia W, Huang J, Sun C, Shen F, Yang K. MicroRNA‑1224 inhibits cell proliferation by downregulating CBX3 expression in chordoma. Oncol Lett. 2024;27(6):262.