引言

高架十字迷宫测试最初是为了检测啮齿动物的情绪反应而建立的。整个装置通常位于离地面500毫米的高度，由两个开放的和两个封闭的臂组成一个十字形。在观察期间，记录动物在每个臂上的探索行为（包括持续时间和进入次数）、行走距离，以及特定行为，如实验动物的头部探索行为。通过这些测量，动物的焦虑程度作为实验结果被估计。以下是一份高架十字 迷宫的实验协议。

一、实验动物

所有实验程序均需获得实验所在区域动物护理和使用委员会的批准。

从实验动物公司购买小鼠。

实验行为开始前至少一周，以每个标准小鼠笼4只动物的小组形式饲养，并铺设纸垫料。

动物房间保持标准环境条件，包括光照（12:12光/暗周期，灯光在10:00点开启）、室温（25.0 ± 0.5°C）、湿度（55 ± 10%）和通风（每小时10次）。

动物可自由取食和水。

二、实验设备

VisuTrack动物行为学分析软件

搭建好十字形铝型材框架，并安放十字迷宫宫体。十字迷宫宫体包括两个开放通道（35厘米×5厘米）和两个相同尺寸的封闭通道，通道高度为10厘米，中央区域（5厘米×5厘米）连接四个臂。为了防止小鼠从开放通道上掉下来，开放臂两端设置了一条突出的边缘（3毫米厚，3毫米高）。

宫体由白色亚克力板组成，并配置黑色底板以便分析小白鼠。闭臂墙壁默认为不透明乳白色的墙壁（也有一些闭臂是透明的，但会对小鼠焦虑水平的检测产生影响，后续会撰文说明），宫体距地面不低于550毫米且高度可调。

在容器顶部设置照明，以照亮迷宫表面到所需的光强度。

在十字迷宫支架中央上安装数字视频摄像机，以实时视频监控行为测试。

三、实验流程

1.每天在固定的时间段测试1小鼠，以避免可能受昼夜变化影响的血浆皮质的醇水平。

2.调整每个臂部远端和中心平台表面的光照强度至约100勒克斯。

3.在每次测试前，用70%乙醇溶液清洁整个装置，并用蒸馏水擦拭。

4.点击VisuTrack软件上的“开始播放”按钮，启动将记录小鼠行为的摄像机，并把测试时间设置为5分钟。

5.将一只动物放置在面向开放臂的中心平台上，并在软件中点“开始分析”，允许小鼠在高架十字 迷宫里自由探索，点击“开始分析后”软件5分钟自动停止分析，并自动生成老鼠的运动轨迹图和运动数据。

6.将测试过的动物送回饲养后，手动计算粪便和尿液的数量，这是因为小鼠排泄物可以侧面的反映出老鼠的焦虑水平。

7.重复步骤3-6重复至所有小鼠实验结束。

四、测试指标

高架十字 迷宫测试主要衡量以下几个参数，这些参数可以被用来评估动物的焦虑水平和探索行为：

开放臂进入次数：这个参数衡量的是动物进入开放臂的频次。动物越愿意进入开放的臂，表明其焦虑程度越低。

封闭臂进入次数：这个参数衡量的是动物进入封闭臂的频次。动物更倾向于进入封闭的臂，可能表明其焦虑程度较高。

开放臂停留时间：这个参数衡量的是动物在开放臂的停留时间。在开放臂停留的时间越长，表明动物的焦虑程度越低。

封闭臂停留时间：这个参数衡量的是动物在封闭臂的停留时间。在封闭臂停留的时间越长，可能表明动物的焦虑程度较高。

总探索时间：这个参数衡量的是动物在迷宫中的总探索时间。这可以用来评估动物的活跃度和探索行为。

下面是一些常用的公式，用于从高架十字迷宫测试中获取有意义的数据：

开放臂进入的百分比：(开放臂进入次数 / 总进入次数) * 100%

封闭臂进入的百分比：(封闭臂进入次数 / 总进入次数) * 100%

开放臂停留的百分比：(开放臂停留时间 / 总探索时间) * 100%

封闭臂停留的百分比：(封闭臂停留时间 / 总探索时间) * 100%