旷场实验

旷场实验

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2024-12-17 11:29:07
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上海晨晔生物科技有限公司

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产品简介

旷场实验清理材料:通常包括一个垃圾桶和纸巾来清理尿液和擦拭旷场。一个小而安静的手持式吸尘器通常很适合清除紧凑的粪便。

详细介绍

一、旷场实验实验设备、材料和设置

1.1. 饲养的房间

隔离声音和不经意间的干扰。如果有环境噪音变化的担忧,可以使用白噪音机器(例如,白噪音发生器,San Diego Instruments,San Diego, CA, USA 或者声音疗法机器,Conair Corporation, Glendale, AZ, USA)。

旷场保持一致的照明。如在“实验变量”中讨论的,不同的研究者使用的照明量差异很大,可以是红色或白色。作为经验法则,我们的实验室通常使用大约30勒克斯的暗光。更亮的光(尤其是更亮的白光)可能会增加触墙性和/或减少运动,但在明亮的环境中进行测试并不少见。无论选择何种光线级别,研究者都应使用光度计记录光线级别,并在任何出版物中报告此级别。

1.2. 旷场的材料

一般使用塑料或耐腐蚀金属更可取,因为这些材料可以轻松清洁和消毒。大小可以大不相同(小鼠推荐至少40 * 40厘米的大小)。墙高应至少为40厘米。这个高度既限制了老鼠看到墙外的能力,也通常足够高,除非在
情况下,可以防止老鼠跳出旷场。通常大鼠的旷场是100cm*100cm*40cm,小鼠旷场为50cm*50cm*40cm,如果使用顶部视频跟踪系统,考虑使用哑光地板以防止反射。

1.2 旷场的材料

一般使用塑料或耐腐蚀金属更可取,因为这些材料可以轻松清洁和消毒。大小可以大不相同(小鼠推荐至少40 * 40厘米的大小)。墙高应至少为40厘米。这个高度既限制了老鼠看到墙外的能力,也通常足够高,除非在情况下,可以防止老鼠跳出旷场。通常大鼠的旷场是100cm*100cm*40cm,小鼠旷场为50cm*50cm*40cm,如果使用顶部视频跟踪系统,考虑使用哑光地板以防止反射。



1.3. 获取数据的方法

将旷场地被划分为不同的区域(图1.1)。更常见的是在配备有光电池的旷场中进行测试,或者动物被计算机化跟踪软件监控。

旷场实验 

                             1.1

1.4. 计时器 这可以由设备或数字跟踪软件自动化,也可以是单独的手持计时器。

1.5. 测试后的新鼠笼

通常,将老鼠放入新笼子比放回原饲养笼那里更可取,因为重新引入老鼠可能会修改尚未测试的老鼠的行为。

1.6. 清理材料

通常包括一个垃圾桶和纸巾来清理尿液和擦拭旷场。一个小而安静的手持式吸尘器通常很适合清除紧凑的粪便。

1.7. 消毒剂 一个装有10-70%酒精的喷雾瓶可以用于一般擦拭。注意,酒精应谨慎使用,因为它可能会导致许多塑料裂纹,并溶解用于将塑料和其他材料粘合在一起的胶水。



二. 实验流程

任何类型的新奇环境或压力都可能改变探索行为。因此,需要减少新奇环境,例如笼子的变化。

对于测试前的一段时间至关重要,通常至少24小时。同样重要的是,所有要在一组内进行比较的动物在其实验中都以相同的方式处理。

根据实验设计,老鼠可能只被测试一次或多次以评估对滥用药物的适应性或敏感性。OFT通常在5或10分钟内进行。如果是自动化的行为学分析系统,允许动物在任何一个时间点在多个旷场中单独测试。

旷场实验 

2.1 在测试前至少1小时将老鼠运送到测试室,让老鼠适应实验室环境。如果转移涉及到环境变化过大或其他可能的压力源,这个时间段应该延长。

2.2 打开视频摄像机、光电检测设备或其他跟踪系统。注意,无论使用何种数据采集方法,好的做法是使用视频摄像机记录每个会话。这样,如果有必要,可以在以后的时间重新评估会话的结果。

2.3 清洁旷场地(OF)。即使在初始试验之前旷场地并不脏,清洁也很重要,这样所有的动物都能平等地体验到消毒剂的残留气味。

2.4 将老鼠放入旷场地。最常见是将老鼠放在靠近墙壁的地方,这是因为这样不会立即将老鼠暴露在压力情境(旷场地的中心)中,或者因为这样可能更容易到达(在旷场地面积大的情况下)。

2.5 启动计时器。

2.6测试者应该离开房间,或者尽可能远离旷场和老鼠的视线。在每次试验中,测试者应保持静止和安静。

2.7在试验结束时,将老鼠从旷场中移出,并放入新的笼子。

2.8计数粪便。如前所述,粪便的数量与动物的情绪或焦虑状态有关。粪便数量的增加与其他焦虑度量相关。

2.9用消毒剂清洁旷场地(如果使用了吸尘器的话)。

2.10在将下一只老鼠放入旷场地之前,等待消毒剂干燥。


三、旷场实验测试指标

通常最有用的结果是

移动的距离(无论是真实距离测量还是相对单位)

移动的时间

在中心的时间

在四周的时间

四周与中心时间的比例

垂直活动和粪便

通常,计算这些输出在整个时间段(例如,总移动距离),并根据测量,也分为时间区间。例如,每5分钟移动的距离是呈现和分析数据的常见方法。实验的主要结果通常被视为连续变量,并根据比较的组数或实验条件的数量,使用t检验或方差分析(ANOVA)进行分析。分箱数据(例如,1小时内每5分钟移动的距离)应通过两因素ANOVA进行分析,时间为一个因素,处理(或基因型等)为另一个因素。

 

 


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