酶联免疫吸附测定(ELISA)
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体 表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
实验步骤
1.将特异性抗体与固相载体 联结,形成固相抗体
2.加受检标本,保温反应
3.加酶标抗体,保温反应。
4.加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。
5.加底终止剂
6.酶标仪检测
结果展示
实验完成周期及交付标准
1. 实验周期:5个工作日
2. 交付标准:ELISA检测原始OD值、ELISA检测标准曲线、ELISA检测目的蛋白浓度值、柱状图、实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)
需确认的信息
1. 样本的种属及类型,是血清还是血浆
2. 样本数为多少,是否需要做重复
3. 是否提供试剂盒,需要进口试剂盒还是国产试剂盒