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李斯特菌检测板
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一、公司概况
广东达元绿洲食品安全科技股份有限公司（简称“食安科技”）源创于1993年，是国内食品安全快速检测行业成功登陆新三板的公司。
公司为高新技术企业，是中国仪器仪表行业协会理事单位和食品安全快检专业委员会主任委员单位，广东省食品安全快速检测工程技术研究中心，guo家级专精特新小巨人企业，广州市企业研究开发机构，获得国家科学技术进步二等奖。
公司集研发、生产、销售、服务于一体，业务范畴包括食品安全快检产品、第三方检测服务、产教融合业务等，为政府、企业和消费者提供整体解决方案，客户遍及全国各省市自治区，产品远销海外。
食安科技在广州高新技术开发区科学城拥集研究、开发、生产和应用为一体的生产基地，总建筑面积1万余平方米。设有管理中心、研发中心、生产制造中心、检验检测中心、服务中心等等。
在研发方面，公司拥有专业人才组成的核心研发队伍，具有雄厚的研发实力，公司每年投入大量科研经费用于新产品的研究与开发，并不断研究国内外本领域技术。拥有各类zhuanli近百项，软件著作权40多项，商标授权19项。
经过近几年的高速发展，已成为目前国内同行业中品种齐全、技术质量先进的生产厂家，部分产品已达到guoji先进水平。本公司产品已在市场监管、出入境检验检疫、疾病预防控制中心、卫生监督、公安、农产品质量检测中心、质监稽查、农产品批发市场、宾馆酒楼和集体食堂等多个部门推广应用，取得了较好的社会效益和经济效益。
企业愿景：我们将以“食安护万家，科技创百年”为企业使命，秉承“责任、进取、专业、协同”的企业精神，立足大健康安全领域，以食品安全检测技术为核心，创新整合发展，为客户、员工、合作伙伴和社会创造价值！
二、公司的资质和荣誉
（一）资质
1.国家高新技术企业
2.guo家级专精特新小巨人
3.广东省食品安全快速检测工程技术研究中心
4.广州市企业研究开发机构
5.中国仪器仪表行业协会食品安全快检专业委员会主任委员单位
6.体系证书：ISO 9001质量管理体系证书、ISO 14001环境管理体系证书
、 OHSAS 18001职业健康安全管理体系证书、知识产权管理体系认证证书、商品售后服务评价体系认证证书、两化融合管理体系评定证书
7.广东省守合同重信用企业
8.广东省知识产权示范企业
……
（二）荣誉
1.国家科学技术进步奖二等奖
2.广东省科学技术奖励一等奖
3.中华农业科技奖二等奖
4.中华预防医学会科学技术奖二等奖
5.广州市科学进步三等奖
6.广东竞争力企业奖
7.guo家级精特新“小巨人”企业
8.广东省预防医学会科学技术奖二等奖
9.广东省食品行业科学技术奖一等奖
……
详细信息
1、李斯特菌检测板原理及适用范围
李斯特菌检测板是一种预先制备好的一次性培养基产品，含有标准的营养培养基，选择性试剂，冷水可溶性吸水凝胶和β-D-葡萄糖苷酶(β-D-glucosidase)的显色底物( X-GLU )，李斯特菌检测板适用于检测或者计数食品及环境样品中的李斯特菌菌数。李斯特菌检测板检测的李斯特菌包括单核细胞增生李斯特菌(Listeria.monocytogenes)，英诺克李斯特菌(Listeria.innocua)，威氏李斯特菌(Listeria.welshi)，但不能区分各种菌。
2、李斯特菌检测板操作方法
2.1 食品样品检测
2.1.1 食品样品处理：取样品25 g(mL)放入装有225mL灭菌磷酸盐缓冲液（或生理盐水）的取样罐或均质袋内，制成1:10的样品匀液。根据样品污染程度及检验需要，可进一步制成10倍递增的样品稀释液，选择2～3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液）来进行接种。
2.2 环境样品检测
2.2.1 环境样品采集：用无菌的涂抹棒或其他采样设备收集环境样品。湿润采样设备液体体积≤10mL。湿润剂可以为无菌水，灭菌生理盐水（磷酸盐缓冲液）或者缓冲蛋白胨水。
2.2.2 环境样品处理：在收集的环境样品中添加10mL 灭菌生理盐水（或磷酸盐缓冲液），充分混匀。根据样品污染程度及检验需要，可进一步制成10倍递增的样品稀释液，选择2～3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液）来进行接种。
2.3 接种：将李斯特菌检测板上层膜不干胶标签部分揭开，用无菌吸管吸取1 mL样品匀液均匀滴加到纸片上，迅速贴好上层膜并水平晃动检测板，静置10s左右，待样品匀液*被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两个检测板作为重复。
2.4 培养：将检测板叠在一起，倒置于36℃±1℃恒温培养箱内，培养18～24h
3、结果判读
在检测板上生长的蓝绿色点即为李斯特菌阳性点，若检测板上无菌生长或者长出点为其他颜色点即为李斯特菌阴性。
4 计数原则及报告方式
4.1 样品计数
4.1.1 以生长有30～300CFU的检测板为计数适宜范围。
4.1.2 若只有一个稀释度检测板上的菌落数在计数合适范围30～300CFU之间，则计算两个检测板菌落数的平均值，再乘以相应的稀释倍数，作为每克（毫升）中菌落总数结果。
4.1.3 若有两个连续稀释度在适宜计数范围内时，按式（1）计算：
∑C
N= ———————— •••••••••••••••••••（1）
（n1+0.1n2）d
式中：
N——样品中李斯特菌菌落数；
∑C——两个连续稀释度检测板（含适宜范围菌落数的检测板）李斯特菌落数之和；
n1——适宜范围菌落数的*个稀释度（低）检测板个数；
n2——适宜范围菌落数的第二个稀释度（高）检测板个数；
d——*稀释度的稀释倍数
示例：
结果表述为2.5×103CFU/g(mL)。
4.1.4 若所有稀释度检测板上均无菌落生长，则以小于1/d（d—zui低稀释倍数）计算。
4.1.5 低数值的估算：如果实验样品原液（水及液体饮料）或初始稀释悬液（其他样品）的两个检测板上的菌落数均小于30CFU，计算两个检测板上的菌落数的平均数。计算式（2）：
∑C
NE = —— •••••••••••••••••••（2）
nd
式中：
NE——每毫升或每克样品中菌数的估算值；
∑C——两个检测板上菌落数的和；
n——检测板的数量；
d——样品初始悬液或实际接种悬液的稀释倍数。
4.1.6 大数值的估算：若所有稀释度的检测板上菌落数均大于300CFU，计数zui接近300CFU的检测板上的菌落并计算出平均数，其他检测板可记录为多不可计。结果计算式（3）：
∑C
NE = —— •••••••••••••••••••（3）
nd
式中：
NE——每毫升或每克样品中菌数的估算值；
∑C——两个检测板上菌落数之和；
n——检测板的数量；
d——与样品悬液相*的稀释倍数。
5、结果报告
固体样品以CFU/g为单位报告，液体样品以CFU/mL为单位报告。
6、附加说明
注意使用过的检测板上带有活菌，需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。
