商品属性：

测定意义：

ATP 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是生物能量通货，能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定 ATP 含量并且计算能荷，能够反映能量代谢状态。 

测定原理：

肌酸激酶催化肌酸和 ATP 反应生成磷酸肌酸，可在 700nm 下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量，以此反应 ATP 含量。 

自备仪器和用品：

酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、96 孔板、研钵和蒸馏水。

试剂的组成和配制：

试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 2.5mL 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。

试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存；

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 1.2mL 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。

试剂四：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；

试剂五：液体 25mL×1 瓶，4℃保存；

标准液：液体 10mL×1 瓶，0.5μmol/mLATP 标准液，4℃保存；

组织样本的前处理：

1、组织中 ATP 的提取：称取约 0.1g 样本，加入 1mL 蒸馏水，冰浴匀浆，100℃加热提取 5min， 8000g 4℃ 离心 15min，取上清液待测。

2、细胞或细菌中 ATP 的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数 量（10 4个）：蒸馏水（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 蒸馏 水），超声波破碎 1min（冰浴，强度 20％或 200W，超声 2s，停 1s），8000g 4 ℃离心 15min； 取上清液待测。

3、血清（浆）中 ATP 的提取：取约 0.1mL 血清（浆），加入 1mL 蒸馏水，冰浴匀浆，100℃ 加热提取 5min，8000g 4℃ 离心 15min，取上清液待测。

测定步骤：

1、酶标仪或分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 700nm，蒸馏水调零。

2、显色剂的配制：临用前请根据拟用显色剂体积（样本数×0.2 m L），按试剂四(mL)：试剂五（mL）=1：5 的比例配制。用多少配多少。

3、样本测定：

试剂名称(μL) 测定管 标准管 空白管

样本 10

标准液 10 10

试剂一 20 20

试剂二 10 10 10

试剂三 10 10

蒸馏水 30

充分混匀，37℃准确水浴 30min

显色剂 200 200 200

37℃水浴 20min 后，700nm 下测定各管吸光值

注意：空白管和标准管通常只需要各做一个。

ATP 含量计算：

1、血清（浆）中 ATP 含量计算

ATP 含 量 (μmol/mL)=[C 标 准 管 ×(A 测 定 管 － A 空 白 管 )÷(A 标 准 管 － A 空 白 管 ) ×V1]÷(V3×V1÷V2)=5×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)

2、组织、细菌或细胞中 ATP 含量计算

（1）按蛋白浓度计算

ATP 含 量 (μmol/mg prot)=[C 标 准管 ×(A 测 定管 －A 空 白管 )÷(A 标 准管 －A 空 白管 ) ×V1]÷(V1÷Cpr）=0.5×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷Cpr蛋白质含量需要另外测定。 （2）按样本鲜重计算

ATP 含 量(μmol/g 鲜 重)=[C 标 准 管 ×(A 测 定 管 －A 空 白 管)÷(A 标 准 管 － A 空 白 管) ×V1]÷(W×V1÷V2)=0.5×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷W

（3）按细菌或细胞密度计算

ATP 含量(μmol/10

4 cell）=[C 标准管×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管) ×V1]÷(500×V1÷V2)=0.001×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)C 标准管：标准液浓度，0.5μmol/mL；V1：加入反应体系中样本体积，0.01mL；V2：加入提取液体积，1mL；V3：加入血清（浆）体积：0.1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL； W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。

注意：低检测限为 10nmol/mL 或 10nmol/g 鲜重或 0.1nmol/mgprot

生化检测试剂盒实验操作说明：

一、抗氧化系列生化检测试剂盒

包括氧化酶（XO）活性分析、超氧阴离子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性（GOD）检测、总抗氧化能力（TAC）检测、植物原花青素(OPC)含量检测、植物类黄酮含量检测、植物总酚（TP）含量检测试剂盒。

氧化酶（XO）活性分析试剂盒为例，提供了一种简单易用的比色分析法，用于测定各种样品中的XO活性，特点是测定血清，血浆，组织/细胞裂解物和其他生物体液中的氧化酶活性，以及广泛的检测范围：15.6 -500 mU/mL。

二、氧化系列生化检测试剂盒

包括过氧化氢酶 (CAT) 活性分析、过氧化氢（H2O2）检测、脂质过氧化(丙二醛) 分析、蛋白质羰基含量检测、超氧阴离子含量检测等试剂盒。

蛋白质羰基含量检测试剂盒（比色法）为例，提供了一种简单易用的比色法，用于分析不同生物样品（细胞/组织裂解液，生物液体）中蛋白质羰基含量。在370 nm处有特征吸收峰。

特点是：1.测定组织样本、细胞、细菌、血清等中的蛋白质羰基含量。2.样本处理、实验步骤以及结果计算更加详尽准确精炼。3.保质期长。

三、抗逆系列生化检测试剂盒

包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力检测、羟自由基清除能力分析、多酚氧化酶（PPO）活性检测、过氧化物酶(POD)活性检测等试剂盒。

超氧化物歧化酶 (SOD) 活力检测试剂盒为例，提供一种简单易用的比色测定法，用于定量测定血清，血浆，组织/细胞裂解液和其它生物体液中的SOD酶活性。

特点是：1.测定血清，血浆，组织/细胞裂解物和其他生物体液中的SOD酶活性。2.通过WST-8法测定SOD活性，zui大抑制率可接近100％，不受一些常见干扰因素的干扰。3.广泛的检测范围：3.13- 200U/mL。

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